实验七 噬菌体效价的测定.docxVIP

实验七 噬菌体效价的测定 实验七噬菌体效价的测定 实验七噬菌体效价的测定 杨明轩生物1111102040128 一、实验目的 1、自学并掌控噬菌体效价的含义及其测量原理。2、自学并掌控双层琼脂平板法测定噬菌体效价。 二、实验原理 噬菌体属细菌病毒，侵染细菌细胞后，可以引致宿主细胞熔化丧生，并在琼脂培养基表面构成空斑，即为噬菌斑。人们可以根据噬菌斑去推论噬菌体的存有。 噬菌体的效价指的是每毫升培养液中含有的具感染性的噬菌体的数量。其测定常用双层琼脂平板法。由此法得到的噬菌斑形态、大小较为一致，且清晰度高，计算准确。该方法首先在无菌培养皿内倒入营养琼脂作为底层，然后将适当稀释的噬菌体与培养至对数期的受体菌混合，保温吸附后，加入冷却至45℃左右的半固体琼脂糖，迅速混匀后铺平板，作为上层，最后倒置培养。只要噬菌体具有感染力就可形成噬菌斑。根据不同稀释度平板上出现的噬菌斑数目，即可算出原液噬菌体的效价。 公式为：噬菌斑构成单位（pfu/ml）＝噬菌斑数×吸收倍数×10 （注：需要说明的是，“×10”表示换算单位，根据本实验步骤，因为加入的是100ul噬菌体原液，换算成1000ul，即1ml，因此“×10”，如有变动更改则需另行计算） 本实验挑选的就是λ噬菌体ea94，它就是一种被改建过的烈性噬菌体。