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DBXX/ XXXXX—XXXX 蛹虫草试管菌种检验规范 1 范围 本文件规定了蛹虫草试管菌种质量的检验内容和方法以及抽样、检验规则等要求。 本文件适用于蛹虫草试管菌种质量的检验。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 4789.28 食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求 GB/T 2828.11 计数抽样检验程序 第11部分：小总体声称质量水平的评定程序 GB/T 12728 食用菌术语 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 3 术语和定义 GB/T 12728 -2006确立的以及以下列术语和定义适用于本文件。 3.1 试管菌种 tube strain 以玻璃试管为培养容器和使用单位的菌种。 3.2 母种 stock culture 经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物,也称一级种。 3.3 原种 mother spawn 由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物，移植、扩大次数不超过4代，也称二级种。 3.4 生物学效率 biological efficiency 单位质量培养料的风干物质所培养产生出的子实体或菌丝体质量（鲜重），常用百分数表示，如风 干料100kg产生了新鲜子实体50kg，即为生物学效率50%。 1 DBXX/ XXXXX—XXXX 3.5 种性 characters of variety 蛹虫草的品种特性是辨别蛹虫草菌种或品种优劣的重要标准之一。一般包括对温度、湿度、酸碱度、 光线和氧气的要求，抗逆性、丰产性、出菇迟早、出菇潮数、栽培周期、商品质量及栽培习性等农艺性 状。 4 仪器设备与环境要求 4.1 仪器设备 测用仪器设备有游标卡尺（量程150mm～300mm，精度0.1mm～0.01mm）、天平（规格0.1g-2000g）、 高压灭菌锅 （0.22MPa，116-134℃）或常压灭菌锅、净化工作台 （100 级@≥0.5µm）或接种箱 （使用前 6～12 小时熏蒸灭菌）、恒温箱或培养箱（RT+10～300℃）、无菌操作室 （每日常规消毒）、培养室、 冰箱或冷库、显微镜 （10-100 倍）、放大镜 （20 倍）及常规用具。高压灭菌锅应使用经有资质部门生 产与检验的安全合格产品。 4.2 环境要求 2 无菌操作室宜小不宜大，一般10～20m 即可，一两台超净工作台为宜。要求封闭性好，干爽安静， 洁净明亮；地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑；无菌操作室应配置拉动门及紫外线灭菌灯。 培养室大小根据要求而定，其设计以充分利用空间和节省能源为原则。基本要求能够控制光照和温 度，并保持相对的无菌环境。为满足培养材料生长对气体需要，应安装排风窗和换气扇等换气装置，为 节省能源和空间，应配置适宜的培养架，内置空调，并安装日光灯照明。每天都要用0.2%的新洁尔灭拖 洗地面—次(拖布要).紫外线照射消毒30-50min。 5 抽样 抽样母种按品种、培养条件、接种时间分批编号；原种按菌种来源、制种方法和接种时间分批编号。 应符合GB/T 2828.11-2008中规定。按批抽取被检样品。 试管菌种抽样方案见附录A。 6 检验内容和方法 6.1 感官检测 6.1.1 容器 肉眼观察母种或一级种试管有无破损。 6.1.2 棉塞或胶塞 手触是否干燥；肉眼观察是否洁净，对光源仔细观察是否有粉状物；松紧度以手提起棉塞（或胶塞） 或拔出棉塞（或胶塞）的状况检查；棉塞（或胶塞）透气性和滤菌性以及观察塞入试管口内或漏出试管 口外棉塞（或胶塞）的长度检查。 6.1.3 培养基贯入量 2