果蝇唾腺染色体观察.pptxVIP

会计学 1 果蝇唾腺染色体观察 实验原理： 果蝇等双翅目类昆虫幼虫期有很大的唾腺细胞，其中的染色体也很巨大：宽约5μm，长约400μm，相当于普通中期相染色体的100-150倍，称巨大染色体（giant chromosome） 唾腺染色体经多次复制而不分开，形成大约有1000-4000根染色体丝的拷贝，又称多线染色体（polytene chromosome） 唾腺染色体有许多重要特点，已为染色体结构畸变、化学组成、基因定位及差异表达研究提供了独特的材料，而唾腺染色体技术也是遗传学研究中一项基本的技术。 有丝分裂中期 第1页/共16页 果蝇唾腺染色体的特点： 巨大； 多线； 体细胞联会： - 唾腺染色体形成的最初，其同源染色体即处于紧密配对几乎完全融合状态。 - 在以后不断的复制中仍不分开，所以唾腺染色体只呈现二倍体染色体数目的单元数。 - 由于其体细胞同源染色体的配对，故易于进行染色体的缺失、重复、倒位和易位的细胞学观察和研究。 第2页/共16页 体细胞联会： 各染色体着丝点附近异染色质区相互结合形成染色很深的染色中心，第Ⅱ、Ⅲ对染色体呈Ｖ形（中着丝粒），各有两臂，Ｘ染色体呈棒状，第Ⅳ对染色体呈粒状（第IV和X染色体为端着丝粒） ，观察时可见5长1短共6条臂由染色中心向外蜿蜒伸展。 果蝇唾腺染色体核型 果蝇唾腺染色体模式核型 果蝇唾腺染色体图 (2n = 8) 第3页/共16页 果蝇唾腺染色体的特点： 4. 横纹: 每条染色体的染色线在不同的区段螺旋化程度不一，出现一系列宽窄不同、染色深浅不一或明暗相间的横纹。 不同染色体横纹宽窄、疏密、数目、形状和排列顺序恒定，具有物种特异性。 - 一旦染色体上发生了缺失，重复，倒位，易位等，也可较容易地在唾腺染色体上观察识别出来。 - 利用这些特征不仅可以鉴定不同的染色体，还可结合遗传实验结果进行基因定位。 杂合子 纯合子 第4页/共16页 果蝇唾腺染色体的特点： 5. Puff（泡/疏松区）: - 幼虫的不同发育期，浓缩的染色质纤维会成群解旋、松开，出现不连续的膨胀,形成泡状松散结构。 - 被认为是这部分基因被激活的标志。 第5页/共16页 实验材料与步骤 唾腺 剖取唾腺： 果蝇三龄幼虫。其它？ 盲囊 气管 脂肪体 第6页/共16页 果蝇的唾腺 第7页/共16页 果蝇的唾腺 詹朝宇 李连杰 2010 柳珍 第8页/共16页 唾腺与肠道的区别 第9页/共16页 步骤 解离：用滤纸吸取多余盐水，在唾腺上 滴一滴 1M HCl ，解离2-3分钟，用蒸馏水洗净，然后让唾腺在蒸馏水中吸涨10-15分钟 染色：将水吸干后滴上几滴改良苯酚品红于唾腺上，染色10分钟（及时补充液）。 第10页/共16页 步骤 压片：盖上盖玻片，左手指按压住，同时用右手大拇指指肚稍用力摁压盖玻片，然后用铅笔头轻敲盖片，最后用吸水纸吸尽多余染液，使唾腺细胞核破裂，核中的染色体舒展开来。 观察：先将压好的玻片标本放在低倍镜下观察，找到清楚的染色体物像后，将观察目标移到视野中心，再用高倍镜观察。 第11页/共16页 唾腺细胞及染色体 （例） 第12页/共16页 唾腺染色体 （例） 钟友邦 2010 第13页/共16页 唾腺染色体 （例） 第14页/共16页 作业与思考 请画一个有代表性的果蝇唾腺染色体图。 总结实验过程中得到合格制片的要点。 果蝇巨大染色体有哪些特点？ 制备果蝇唾腺染色体有何用处？ 第15页/共16页