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d抗生素产生菌的菌种筛选及优化会计学第1页/共202页1、抗生素产生菌教材第一章、第一节：p1-19半数以上抗生素由放线菌产生，链霉菌，真菌与细菌。真菌抗生素第2页/共202页真菌抗生素主要是青霉和产黄青霉产生的青霉素，灰黄青霉产生的灰黄霉素。灰黄霉素抗真菌（皮肤病与灰指甲病），对细菌无效。青霉素抗G+菌有效，对G-菌作用很弱，对人的副作用小，有过敏反应。第3页/共202页青霉素是一类群化合物，不同青霉素的侧链R各异。常用青霉素G，R为苯甲基。低浓度抑菌，高浓度杀菌。有的细菌产生青霉素酶，使酰胺环开裂而失去作用。细菌抗生素多是多肽类化合物。如短杆菌的短杆菌素S，枯草芽孢杆菌的枯草杆菌肽，多粘芽孢杆菌的多粘菌素等，对动物有毒性，只限外用。抗生素产生菌的分离和筛选第4页/共202页目前新抗生素的获得途径： 1、从自然界分离筛选新抗生素产生菌 从土壤到海洋；到极端微生物； 从微生物到植物、动物。2、改造现有的已知抗生素的产生菌，再经筛选获得新得抗生素产生菌。3、从已知的抗生素进行结构改造，经筛选获得新的半合成抗生素。第5页/共202页 4、采用新的筛选方法 如：应用定向生物合成和突变生物合成的原理，以及培养超敏细菌以寻找微量的抗生素，选用新的肿瘤模型来筛选抗肿瘤的抗生素。第6页/共202页5、采用现代分子生物学技术产生新抗生素（1）基因克隆产生新抗生素：首先获得某已知抗生素的结构基因，然后通过一定的载体将基因片段导入特定的另一种抗生素产生菌中，则可能产生完全符合人们设计要求的新抗生素。 （2）沉默基因的激活： 引入抗生素生物合成的调控基因，有可能激发抗生素产生菌处于休眠状态或沉默状态的基因系统，从而开启另一结构抗生素的生物合成开关，得到新抗生素。第7页/共202页生产中常用菌种的分离、选育和保藏 一、菌种的来源第8页/共202页根据资料直接向有科研单位、高等院校、工厂或菌种保藏部门索取或购买；从大自然中分离筛选新的微生物菌种。 第9页/共202页二、分离思路 新菌种的分离是要从混杂的各类微生物中依照生产的要求、菌种的特性，采用各种筛选方法，快速、准确地把所需要的菌种挑选出来。实验室或生产用菌种若不慎污染了杂菌，也必须重新进行分离纯化。 有了优良的菌种，还要有合适的工艺条件和合理先进的设备与之配合。第10页/共202页三、新种分离与筛选的步骤定方案：首先要查阅资料，了解所需菌种的生长培养特性。采样：有针对性地采集样品。增殖：人为地通过控制养分或培条件，使所需菌种增殖培养后，在数量上占优势。分离：利用分离技术得到纯种。发酵性能测定：进行生产性能测定。这些特性包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工艺等。第11页/共202页 （一）采样1、采样对象 以采集土壤为主。一般园田土和耕作过的沼泽土中，以细菌和放线菌为主，富含碳水化合物的土壤和沼泽地中，酵母和霉菌较多，如一些野果生长区和果园内。采样的对象也可以是植物，腐败物品，某些水域等。第12页/共202页从自然界筛选第13页/共202页2、采样季节：以温度适中，雨量不多的秋初为好。3、采土方式：在选好适当地点后，用小萨子除去表土，取离地面5-15cm处的土约10g，盛入清洁的牛皮纸袋或塑料袋中，扎好，标记，记录采样时间、地点、环境条件等，以备查考。为了使土样中微生物的数量和类型尽少变化，宜将样品逐步分批寄回，以便及时分离。第14页/共202页培养基的组成原则大多数放线菌的分离培养是在贫脊或复杂底物的琼脂平板上进行的。除嗜温性放线菌外，其他放线菌一般在培养4-20天内在分离平板上缓慢形成菌落。在放线菌分离琼脂中通常都加入抗真菌剂制霉菌素或放线菌酮，以抑制真菌的繁殖。选择性地添加抗生素。分离琼脂平板制备好后，一般皆应在37℃培养箱中存放3天。第15页/共202页培养基选择和配制原则 营养吸收的过程微生物的营养活动是依靠外界分泌大量的酶，将周围环境中大分子蛋白质、糖类、脂肪等营养物质分解成小分子化合物，借助于细胞膜的渗透作用，吸收这些小分子营养物质来实现。培养基是提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的,按一定比例配制的多种营养物质的混合物。第16页/共202页培养基选择和配制原则 培养基设计所要考虑的问题为微生物生长繁殖、产物合成提供所需的物质。工业发酵考虑原料价格问题。培养基设计的共同特点碳源、氮源、无机元素、生长因子、水、氧气第17页/共202页一、培养基的类型和用途据来源天然培养基、合成培养基、半合成培养基液体培养基、固体培养基、半固体培养基主要成分或使用目的基础培养基、增殖培养基、鉴别培养基、选择培养基据生产工艺孢子培养基、种子培养基、发酵培养基第18页/共202页二、培养基的选择据微生物的特