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- 2023-01-31 发布于江苏
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实验十九 DNS 法及聚酰胺薄膜层析技术测定蛋白质
N—末端和蛋白质的氨基酸组成分析
一、目的:
学习DNS 法及聚酰胺薄膜层析法测定蛋白质N—末端和蛋白质的氨基酸组成的原理及技术。
二、原理:
DNS—Cl 在碱性环境里蛋白质和肽的α-氨基酸的氨基起反应,生成带有荧光的、稳定的DNS-氨基酸(参看图 19-1,19-2),其反应如下:
蛋白质在水解前与DNS—Cl 反应,产生 DNS-蛋白质,它标记在 N-末端氨基酸残基上, 经水解和薄层层析而测知是何种氨基酸。蛋白质水解后与DNS—Cl 反应,标记的是蛋白质的氨基酸组成成分,如图 19-1 和图 19
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