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基因工程简介复习会计学第1页/共18页基因工程的概念是什么？基因操作的工具酶有几种？分别是什么？基因的剪刀是什么？其主要作用是什么？基因的针线是什么？其主要作用是什么？基因的运输工具是什么？运载体必须具备的条件是什么？ 最常用的运载体是什么？质粒的结构是什么？基因操作的基本步骤？ 第2页/共18页例：金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病。降低观赏价值。科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的新品种。根据图回答：培养选择获得抗病基因的茶花细胞带有抗病基因的某植物细胞 一、基因操作的工具第3页/共18页（限制酶）⑴基因的剪刀——限制性内切酶⑵基因的针线——DNA连接酶⑶基因的运输工具——质粒运载体 第4页/共18页一、基因操作的工具⑴基因剪刀——限制性内切酶（限制酶）①分 布：②作用特点：主要在微生物中。专一性 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子多样性 限制酶有200多种③结 果：产生黏性末端 第5页/共18页④举例：大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 第6页/共18页⑵基因的针线——DNA连接酶①连接的部位：②结 果：黏性未端的连接起来。 第7页/共18页⑶基因的运输工具——运载体 ①作 用：将外源基因送入受体细胞②具备的条件：能在宿主细胞内复制并稳定地保存具有多个限制酶切点具有某些标记基因，便于进行筛选③种类：质粒、噬菌体和动植物病毒 质粒的复制能在宿主细胞外完成吗？质粒的存在对宿主细胞有无影响？思考题：要想将某个特定基因与质粒相连，需要用几种限制性内切酶？④质粒的特点：第8页/共18页 质粒是基因工程中最常用的运载体最常用的质粒是大肠杆菌的质粒分 布：存在于许多细菌及酵母菌等生物中化学本质：细胞染色体外能自主主复制的小型环状DNA分子 第9页/共18页3.　基因操作的基本步骤提取目的基因目的基因与运载体结合将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和表达 第10页/共18页3.　基因操作的基本步骤： 如何操作？有何缺点？ （1）提取目的基因直接分离基因：“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。方法反转录法 人工合成基因： 据已知的氨基酸序列合成 （ 2）目的基因与运载体结合如何操作？操作方法？用了哪些工具酶？（ 3）将目的基因导入受体细胞借鉴方法？细胞壁用何种物质处理？作用？受体细胞有那些？（4）目的基因的检测和表达如何检测？ 　用限制酶切断成许多片段第11页/共18页直接分离基因——鸟枪法　用限制酶将通体细胞中的DNA切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让外源DNA在受体细胞中复制而扩增，找到含有目的基因的细胞，分离出含有目的基因的DNA片段缺点： 带有很大的盲目性，工作量大，成功率低。 第12页/共18页人工合成基因反转录法反转录合成mRNA目的基因的单链DNA双链DNA蛋白质的氨基酸序列人工合成基因目的基因结构基因的核苷酸序列推测mRNA推测合成 第13页/共18页（ 2）目的基因与运载体结合 用同一种限制酶去切割质粒和目的基因，加入DNA连接酶，形成重组DNA分子（重组质粒）（ 3）将目的基因导入受体细胞借鉴噬菌体侵染细菌的方法来进行。 为使重组的DNA分子更容易进入受体细胞，通常要用CaCl2对受体细菌进行处理，使受体细菌具有更大的通透性。 CDBA（4）目的基因的检测和表达 第14页/共18页　全部受体细胞中，摄入重组DNA 分子的受体细胞是很少的。要进行检测目的基因是否导入成功，如何检测？ 第15页/共18页表达：受体细胞表现出特定的性状。重组的DNA分子进入受体细胞后，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程 第16页/共18页基因工程概念 ——定向改造生物的新技术 别 名操作环境操作对象操作水平基本过程结 果基因拼接技术 DNA重组技术生物外基因DNA分子水平剪切→拼接→导入→表达人类所需要的产品基因重组原 理： 第17页/共18页基因工程 在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的产品。