荧光共振能量转移FERT.pptxVIP

分子能级与荧光S0S1T1hn0hn1hn22. 荧光（Fluorescence)：当处于基态的分子吸收光能后进入激发态，并且立即返回基态并以光的形式释放能量，这种光称为荧光。 4. 激发(Excitation, Ex)和发射(Emission, Em)光谱（Spectra):1. 能级（ Energy Level）：原子的可能状态是不连续的，因此各状态对应能量也是不连续的。包含电子能级、振动能级和转动。3. 磷光（Phosphorescence）:分子从激发三线态返回基态以光的形式释放能量。第1页/共14页第一页，共15页。 CFPEx. 440nmEx. 470nmEm. 470nmYFPEm. 535nm荧光共振能量转移(FRET)现象3. FRET现象的特征: 选择性激发供体,却能检测到受体发射的荧光1. 供体(Donor, D)Donor2. 受体(Acceptor, A)Acceptor第2页/共14页第二页，共15页。 FRET 原理(Principle)第3页/共14页第三页，共15页。 FRET的条件发生FRET需要三个条件：1、供体分子的发射光谱和受体分子的吸收光谱必须有显著的重迭，一般大于 30％；2、供体分子和受体分子间的距离必须在 1 – 10 nm 之间. D和A间的FRET 效率： 3、供体分子的发射态偶极矩与受体分子的吸收态偶极矩、以及它们的向量