松材线虫病检测技术.docVIP

松材线虫病检测技术 一、室内检验 a、抽样和取样：在调运检疫时抽取有上述症状的部分检疫物，抽样数量为每批次总件数的0.5-5.0%，但最低不得少于5件。若无明显症状时可随机抽样。 在进行病害调查时，则选取有松材线虫病症状的样株，根据具体情况砍取木段或钻取木屑进行室内检验。 在所选取的样木（样品）或样株上钻取少量木屑约10g，每样3个重复。取样时要注意选取靠近蛀道、蛹室的部位，所取样品不得带有树皮。对所取样品标号后带回实验室检验。必要时可将整件样木(或样品)带回实验室备检。 b、分离线虫：将各标号样品分别进行线虫分离。 分离线虫可采用贝尔曼(Baermann)漏斗法或浅盘法。 对媒介昆虫进行线虫分离时，可将其用剪刀或尖头镊子、解剖针等剪碎或撕碎后同样采用上述方法进行。分离时若室温较低(不得低于7℃)可根据室温高低将分离用水调至20—40℃(不得超过40℃)后浸泡分离材料，3—4小时线虫游离出一定数量后即可镜检。一般情况24小时后镜检。 贝尔曼(Baermann)漏斗法：将大小适当(直径10—15cm)的漏斗末端接一段长约10cm的乳胶管后置于漏斗架上，在乳胶管上装一止水夹。剪大小适当纱布两层铺在漏斗上。将带到实验室的样段去皮后劈成长约3—4cm的细条或钻取木屑，约取小木条(或木屑)10g置于漏斗上的纱布中，将纱布四角向中间盖上分离材料，然后注入清水浸没。注入清水后要注意使水充满漏