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实验室移液枪的操作和维护 移液枪是实验操作上不可缺少的工具，对于顶尖高手而言，重要的就是实验的误差最小，重复再现性好，那就要注意正确移液枪使用。 移液枪的分类和工作原理 气体活塞式移液枪 工作原理：通过弹簧的伸缩运动，推动活塞，排除部分空气，利用大气压吸入液体，再由活塞推动空气排除液体。 塞式移液枪 工作原理：通过分液管或吸头内活塞的连续运动移取和打出液体，活塞和液体直接接触，没有空气柱，适用于密度、黏度与水不同的液体，如易挥发性溶液、粘稠液体等。 移液枪使用诀窍 气体活塞式移液枪 1影响移液枪精度因素 (1)温度：室温低时，手温较高，使得空气膨胀，吸入冷溶液时往往发生误差。 (2)气密性：吸头和枪体的结合部，以及枪内柱体之间的长期磨损，造成误差。 (3)吸速：容易造成吸头内气泡产生，而且会污染枪头。 (4)试剂的挥发：吸挥发性高的试剂时，蒸汽进入枪头，内压增高，结果在压出液体时，压力变大，而产生误差。解决办法：反复抽吸4-5次就可改善。 2具体使用方法 更换tip法：最精确。 (1)调节旋钮到所需刻度位置，诀窍：首先可略超过一些，再回旋至刻度。注意禁止超过最大刻度，避免人为误差。 (2)插上tip:无菌操作时，要注意动作迅速正确，不能用手碰tip，动作的力度要保持一致，禁止废动作。普通操作时，可用拇指食指上紧，但手不能碰tip尖端处。 (3)指压到第一段，tip尖端接触试剂。白色tip进到液面1mm一下，黄色吸头2-3mm，蓝色吸头2-4mm，避免液压的影响造成的误差。 (4)缓慢吸试剂，禁止速度过快，液体进入枪头。 (5)移出吸头后，先在容器内壁轻轻靠住，使吸头外壁液体流下。 (6)将吸头贴在目标容器内壁，轻轻按到第一段，压出液体。 (7)吸头尖端在容器内壁略上滑动，保留尖端少量液体，移出目标容器，手指卸掉吸头，注意不要使试剂溅出。 一只吸头分注法：不适用于挥发性，有毒性试剂。 (1)同上述A-D，移出液面后，先缓慢按到第一段，在用力按到第二段，将试剂全压出。 (2)同上述C，缓慢吸出液体。 (3)在目标容器液体上空，压出试剂到第二段，注意压的力度要和A相同，还应注意试剂不要四处飞溅。 (4)缓慢返回第一段，可重复上述操作。达到目标容器原有液体不污染吸头的目的。 转移数ul的贵重试剂时的方法： (1)同上述A-D，移出液面后，在容器内壁轻按几下，使外壁液体流下。白色吸头进到液面1mm以下，这最重要。 (2)tip尖端浸入目标容器的液面下，缓慢压到第一段。 (3)松开，返回到第一段，重新吸入液体，反复4-5次，，洗净吸头内壁液体。 (4)将吸头尖端移出液面，在内壁轻轻靠住，压出液体到第二段。 移液枪使用注意事项，要注意以下几点： 1.正确选择移液枪与吸头组合量程 空气柱的体积越小，误差越低。 2.吸头的浸没深度 吸头尽量浸没得浅一些，防止液体残留在吸头表面，但是同时要浸没得足够深防止吸取空气。 3.垂直吸取液体 移液时角度不同，液体压力也会改变。 4.预润湿 通过预润湿，使得空气柱充满饱和的液体分子，至少预润湿3次，使得空气柱里的液体分子达到饱和。 5.正确的放液操作 放液时，吸头尖靠在容器内壁，完全打出，排出最后的液滴;体积低于10ul直接放液到容器底部。 6.缓慢、匀速的吸放液体，保证结果的精确性。 移液六部曲 1.装吸头 移液器套柄用力下压，需要时小幅度旋转即可。 错误操作：用力敲击吸头。此方法会带来吸头损坏甚至移液器套柄磨损，从而影响其密封性。 2.量程设定 操作之前请先选择正确的移液器，移液器可在10-100%量程范围内操作，但在10%量程处操作对于移液技巧要求高，故推荐在35-100%量程范围内操作。 量程调节：当由小量程调节至大量程时，朝所需量程方向连贯旋转，旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程。当由大量程调节至小量程时，直接连贯旋转至所需量程。 3.润洗 用同一样品重复吸液排液二至三次，润洗为以后每次吸液提供相同的接触面，保证操作的一致性。 注意：高温或者低温液体请不要润洗! 4.吸头浸入角度 吸液时尽量保持垂直状态，倾斜角度不能超过20°。 5.吸头浸入深度：0.1-10ul:1-2mm、10-200ul:2-3mm、200-2000ul:3-6mm、over2000ul：6-10mm。 6.吸头浸入时间 吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开，这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤为重要。 7.吸液速度 匀速连贯移液，控制好移液速度，太快会造成喷液，液体或者气雾冲入移液器内部，污染活塞等部件。 8.排液及吹液 先将活塞按至第一档排液，略作停顿后按至第二档进行吹液。 排液四种方式：沿内壁、在液面以上、在液体表面、液面下。 9.手温 移液器不宜长时间握在手里，不用时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾