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讲基因工程操作程序课件 目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定 1、什么是目的基因？2、获取目的基因的方法有哪些？其操作过程分别是怎样的？ 1、目的基因概念：主要指的是编码蛋白质的结构基因。也可以是一些具有调控作用的因子。2、目的基因获取方法：从基因文库中获取目的基因利用PCR技术扩增目的基因化学方法直接人工合成 基因文 库基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。基因组文库基因文库部分基因文库（如cDNA文库） 供体细胞的全部DNA基因组文库大量DNA片段拼接到载体上 逆转录mRNA 单链DNA 双链DNAcDNA文库 基因文 库如何从基因文库中找到所需要的基因？依据目的基因的有关信息。如：根据基因的核苷酸序列基因在染色体上的位置基因的转录产物mRNA基因翻译产物蛋白质等特性。 PCR技术扩PCR的全称：聚合酶链式反应PCR的原理：DNA复制PCR技术扩增目的基因的前提条件：要有一段已知的目的基因的核苷酸序列。 PCR技术扩PCR的条件：模板 ——目的基因DNA原料 ——四种脱氧核苷酸引物——如单链DNA分子片段　酶——耐热的DNA聚合酶控制温度——PCR仪自动调控 PCR技术扩PCR的过程：变性(90-95℃)复性(55-60℃)(退火）延伸(70-75℃) 人