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本发明公开了一种基于高通量测序对TCRβ进行定量的方法,包括如下步骤:使用Trizol裂解样本,在裂解样本中加入外参细胞裂解液;提取样本和外参细胞的总RNA;利用TCRβ的C端特异性引物进行反转录;在反转录产物中加入模板;使用一组优化了序列组成和使用浓度的多重PCR引物构建TCRβ的高通量测序文库,并进行测序;利用2轮外参数据对样本中的TCRβ进行定量。本发明通过加入外参细胞,可对样本的T细胞总数进行有效估计;通过使用优化了序列组成和使用浓度的多重PCR引物,可更好的减少多重引物相互之间的干扰和
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 114561454 A
(43)申请公布日 2022.05.31
(21)申请号 202210222259.5
(22)申请日 2022.03.03
(71)申请人 中国人民解放军陆军军医大学
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