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本发明属于分子生物学领域，利用水稻的tRNA序列构建了tRNA‑gRNA系统，该系统在青鳉胚胎和细胞中能在RNA聚合酶启动子CMV的作用下产生具有功能性的gRNA，而不需要在体外先转录gRNA，从而与CRISPR/Cas9系统共同作用对青鳉基因组进行基因编辑。该方法证明了CMV‑tRNA‑gRNA序列在鱼类细胞和胚胎内能产生有作用的gRNA并和Cas9一起进行基因编辑，同时设计了cRNA‑tRNA的策略为多基因靶位能够一步从该策略的模板进行克隆提供了便利，为多基因靶位的同步克隆和敲除提供方案，也
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 112442512 A
(43)申请公布日
2021.03.05
(21)申请号 20191
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