两种(超)耐热型甘露醇脱氢酶的鉴
甘露醇脱氢酶是一种关键酶,在生物代谢中发挥重要作用。随着热力学控制分子晶体学和高通量筛选技术的发展,越来越多的甘露醇脱氢酶(MDH)已被鉴定和研究,并且有很多工作集中在探索具有高(超)耐热性的MDH酶。本文将讨论两种(超)耐热型甘露醇脱氢酶的鉴定工作。
1. Thermoanaerobacter pseudoethanolicus 39E甘露醇脱氢酶(TpMDH)
Thermoanaerobacter pseudoethanolicus 39E 是一种厌氧、热热的革兰氏阳性细菌,能够利用双糖和多种糖原合成甘露醇。该菌株沿着发酵途径生成丙酮酸转移酶和甘油-3-磷酸去氢酶,其次是甘露醇脱氢酶(MDH),最后是酒精脱氢酶和乙酰辅酶A还原酶。TP-1161基因编码TpMDH分子质量为34 kDa,且在生物系统中表达非常丰富。
TpMDH的鉴定工作是由张波等人开展的,使用SDS对纯化蛋白进行分析,同时采用反向酶学分析、酶电泳以及大肠杆菌转化体外表达等方法对其进行了生物活性的验证。另外,还通过催化亚细胞定位、序列分析、结构分析等多种手段对其进行了深入研究。根据结果显示,该酶的比活性最为显著,其热稳定性和耐受性均极强,在100℃下仍具有40%的酶活性。
2. Thermotoga thermarum DSM5069 甘露醇脱氢酶 (TtMDH)
Thermoto
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