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融合表达禽致病性大肠杆菌fimA-ompC基因及微皱
大肠杆菌是常见的肠道非致病性菌,然而某些菌株能够引发严重的疾病,如泌尿系感染、败血症、坏死性肠炎等。其中,禽致病性大肠杆菌是一类在家禽中引起严重疾病的菌株,其病原性与多个基因密切相关。在这些基因中,fimA和ompC基因在菌株的定位粘附以及细胞外膜通透能力方面起着重要作用。
fimA基因编码着毛细胞纤毛的主要亚单位,同时也是FimA抗原的重要来源,其在菌株的致病性过程中扮演着重要角色。ompC基因则编码着一种外膜蛋白,能够调节菌株对抗胁迫条件下的存活能力。因此,融合表达这两个基因,有可能增强禽致病性大肠杆菌的病原性,提高其感染力。
在本次研究中,我们采用了微胞技术,将fimA和ompC基因进行了融合表达,并嵌入了宿主菌株中。同时,我们还研究了菌株在微皱表面的定位粘附和细胞外膜通透能力,以探究融合表达基因对其致病性的影响。
首先,我们对融合表达的fimA-ompC基因进行了PCR确认,结果显示成功融合,并构建了表达载体。随后,我们将表达载体导入到化学制造的宿主菌株中,通过蛋白质表达分析和Western blot检测,证实了成功的表达和融合效果。
随后,我们进行了微皱表面粘附实验。结果表明,融合表达菌株的定位粘附数量显著高于对照组,表明融合表达基因能够增强菌株的定位粘附能力。同时,我们进一步采用电镜技术观察了微皱表面下融合表达菌株的形态结构,并证实其具有明显的纤毛形态。
在细胞外膜通透能力方面,我们通过人造孔技术进行了实验,结果表明,融合表达菌株的膜通透能力显著高于对照组,表明融合表达基因能够增强菌株的细胞外膜通透能力。
综上所述,我们成功融合表达了禽致病性大肠杆菌的fimA和ompC基因,并证实该基因组合能够增强菌株的病原性,提高其感染力。本研究结果为禽致病性大肠杆菌的病原性机制研究提供了新思路,同时也为禽类疫病的预防和治疗提供了新的研究方向。
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