MIR-124-5P对LAMB1转录后调控作用抑制高.docx

MIR-124-5P对LAMB1转录后调控作用抑制高 LAMB1是一种编码Laminin Beta-1链的蛋白质，在细胞外基质中具有广泛的功能。LAMB1的异常表达和功能异常与多种疾病的发生和发展相关，如肿瘤的侵袭、转移、血管新生、炎症和纤维化等。因此，寻找调控LAMB1的信号通路和因子成为研究重点之一。本研究海选到正向调控LAMB1表达的miRNA中的MIR-124-5p，并探究其作用及机制。 实验设计：采用miRNA微阵列芯片和实时定量PCR技术筛选调控LAMB1表达的miRNA。利用生物信息学工具，结合文献报道、数据库和实验验证，筛选出正向调控LAMB1的miRNA。体外和体内实验证明，MIR-124-5p显著抑制LAMB1的表达，并调控了肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡等生物学行为。进一步分析发现，MIR-124-5p通过抑制LAMB1表达，调节了PI3K/Akt和ERK1/2信号通路。 结果分析：采用miRNA微阵列芯片和实时定量PCR筛选出正向调控LAMB1的miRNA列表，其中MIR-124-5p在24种肿瘤细胞系中的表达较高。在Hela和MCF-7细胞中，转染MIR-124-5p mimics后LAMB1的表达显著下调。同时，MIR-124-5p启动子活性实验表明，该序列能够激活转录，因此MIR-124-5p是调控LAMB1转录的因子。通过启动子实验进一步发现，MIR-124-5p同时也是LAMB1的直接转录因子。 进一步研究发现，MIR-124-5p不仅对LAMB1的表达量具有调节作用，同时还能影响肿瘤细胞的生物学行为。细胞增殖和侵袭能力测试显示，转染MIR-124-5p mimics后细胞的繁殖和侵袭能力都显著降低；而细胞迁移能力测试中发现，转染MIR-124-5p mimics后细胞的速度也显著减慢。在细胞凋亡方面的研究中，转染MIR-124-5p mimics后细胞的早期凋亡率明显增加。综合这些结果可以看出，MIR-124-5p调节LAMB1的表达并通过调节肿瘤细胞的生物学行为来影响肿瘤的发生和发展。 最后，作者发现MIR-124-5p通过调节PI3K/Akt和ERK1/2信号通路来调节肿瘤细胞的生物学行为。Western blot实验证明，MIR-124-5p通过抑制LAMB1导致PI3K/Akt和ERK1/2信号通路的活化程度下降，从而影响细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡等生物学行为。因此，MIR-124-5p通过调节LAMB1转录来影响肿瘤细胞的生物学行为，同时可以作为治疗肿瘤的新靶点。