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梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)作业指导书
原理
采用VDRL抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液,在白色卡片上进行试验,检测血清或血浆中反应素。可作为梅毒病人的诊断和疗效参考。
标本采集
2.1 标本采集前病人准备:受检者应空腹。
2.2 标本种类:血清
2.3 标本要求:采集静脉血2ml,室温放置不超过4小时,分离血清备用。
3. 标本储存: 待测样本在2–8℃不超过48小时,-20℃不超过三个月,-70℃以下长期保存。应避免反复冻融。
4. 标本运输:室温运输。
标本拒收标准:细菌污染、溶血、脂血标本不能作测定。
试剂
6.1 试剂名称:梅毒甲苯胺红不加热血清试验诊断试剂盒
6.2 试剂生产厂家:xx生物技术有限公司
6.3 包装规格:120人份
6.4 试剂组成:
6.4.1 TRUST抗原悬液 2.5ml×1瓶
6.4.2 阳性对照血清 1m×1支
6.4.3 阴性对照血清 1m×1支
6.5.4 试验专用卡片 120人份
6.5.5 专用滴管及针头 1套
6.5.6 使用说明书 1份
6.5 试剂储存条件及有效期:保存于2-8℃,有效期1年。
操作步骤
7.1 定性试验:
7.1.1 分别吸取50微升梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。
7.1.2 取待检血清50微升(不需灭活)置于纸卡的另一圆圈中。
7.1.3 用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂1滴于上述血清中。
7.1.4 按每分钟100转摇动8分钟,肉眼观察结果。
7.2 定量试验
将待检血清用生理盐水作倍比稀释,然后按上述定性方法进行试验,以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。
结果判断
8.1 阳性反应(+++~++++):可见中等或较大的红色凝聚物。
8.2 弱阳性反应(+~++):可见较小的红色凝聚物。
8.3 阴性反应(-):可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物。
临床意义
TRUST阳性为诊断梅毒的筛选试验。
参考范围:阴性
质量控制:
每次试验均应做阴性和阳性对照,阴性对照不出现凝聚物,阳性对照出现明显凝聚物;同时应以2NCU/ml含量的梅毒抗体质控血清试验,应出现可见凝聚物。
操作性能:快速简便、灵敏度高,重复性好。
方法局限性:该方法特异性有限,只能用作诊断梅毒的筛选试验。
注意事项:
14.1 本试验在23~29℃条件下进行。
14.2 试剂使用前应充分摇匀。
14.3 本试验系非特异性反应,需结合临床进行综合分析,必要时需作梅毒螺旋体抗体特异性试验。
参考文献:
中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第二版)433-434页。
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