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本发明涉及一种ALPL基因缺失骨髓间充质干细胞的建立方法,具体步骤包括:1)根据ALPL基因序列,设计sgRNA序列;2)sgRNA活性检测,确定最优sgRNA,最优sgRNA序列为GATGGACAAGTTCCCCTTCG;3)将步骤2)中切割效率最高的sgRNA和嘌呤霉素抗性的PGK‑puro质粒电转到骨髓间充质干细胞;4)基因敲除验证;5)将基因敲除质粒进行测序,利用本发明方法构建的ALPL基因缺失骨髓间充质干细胞,可用于筛选促成骨形成药物。
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 113249332 A
(43)申请公布日 2021.08.13
(21)申请号 202110798208.2
(22)申请日 2021.07.15
(71)申
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