紫外吸收和荧光光谱法.pptVIP

2.单色器 作用：从连续光源中分离出所需要的足够窄波段的光束 常用的元件：棱镜、光栅 第二十九页，共六十六页，2022年，8月28日 3.吸收池 功能：用于盛放试样，完成样品中待测试样对光的吸收 常用的吸收池：石英（紫外区） 玻璃（可见区） 吸收池光程：1cm 、2cm、3cm等 第三十页，共六十六页，2022年，8月28日 4.检测系统 作用：接受、记录信号 组成：检测器、放大器、读数和记录系统 常用检测器： 光电管 蓝敏光电管 210～625nm 红敏光电管 625～1000nm 光电倍增管 第三十一页，共六十六页，2022年，8月28日 5.仪器类型 第三十二页，共六十六页，2022年，8月28日 单光束分光光度计 优点：结构简单，价格便宜 缺点：受光源影响波动大 第三十三页，共六十六页，2022年，8月28日 双光束分光光度计 优点：可直接读数；可进行扫描测量；可进行自动测量；消除了仪器光强变化带来的误差 光源 试样溶液IS 参比溶液IR 单色器I0 试样溶液的吸光度 第三十四页，共六十六页，2022年，8月28日 双光束分光光度计动画示意图 第三十五页，共六十六页，2022年，8月28日 双波长分光光度计 优点 不用参比溶液，只用一个待测试液，直接而完全地扣除背景，从而提高了灵敏度，适合于微量组分的测量。 可进行双组分同时测定而无需解方程 第三十六页，共六十六页，2022年，8月28日 双波长分光光度计示意图 第三十七页，共六十六页，2022年，8月28日 第六节.紫外可见分光光度法应用 光谱定性分析基础： 吸收曲线的形状和最大吸收波长 用于有机化合物的结构鉴定；同分异构体的鉴别、物质结构测定。 光谱定量分析的基础： 某一波长下测得的吸光度与物质浓度关系的工作曲线，一般以?max处的吸光度与物质浓度之间的关系作工作曲线 第三十八页，共六十六页，2022年，8月28日 定性分析 有机化合物的定性分析 立体结构和互变结构的影响 纯度检查 第三十九页，共六十六页，2022年，8月28日 1.有机化合物的定性分析 在200~800nm范围内无吸收峰，该有机化合物可能是链状或环状的脂肪族化合物，或是它的简单的衍生物，如醇、胺、氯代烷及不含双键的共轭体系。 在210~250nm范围内有强吸收带（ε=2×104~1×104），可能含有两个共轭双键。 在210~300nm有强吸收带，可能含有3~5个共轭双键。 在250~300nm有吸收峰，表示有羰基存在；有中强吸收峰且有振动结构时，表示有苯环。 可获得的结构信息 第四十页，共六十六页，2022年，8月28日 (1) 确认?max，并算出㏒ε，初步估计属于何种吸收带； (2) 观察主要吸收带的范围，判断属于何种共轭体系； (3) 乙酰化位移 B带： 262 nm(ε302) 274 nm(ε2040) 261 nm(ε300) (4) pH值的影响 加NaOH红移→酚类化合物，烯醇。 加HCl蓝移→苯胺类化合物。 光谱解析注意事项 第四十一页，共六十六页，2022年，8月28日 2. 立体结构和互变结构的影响 顺反异构： 顺式：λmax=280nm； εmax=10500 反式：λmax=295.5 nm；εmax=29000 互变异构： 酮式：λmax=204 nm ? 烯醇式：λmax=243 nm 第四十二页，共六十六页，2022年，8月28日 3. 纯度检查 第四十三页，共六十六页，2022年，8月28日 定量分析 透射比和吸光度 Lambert-Beer定律 偏离Lambert-Beer定律的因素 实验条件的选择 多组分的定量分析方法 第四十四页，共六十六页，2022年，8月28日 1.透光率和吸光度 当一束平行的单色光照射均匀的有色溶液时，光的一部分被吸收，一部分透过溶液，一部分被比色皿的表面反射。如果入射光的强度为I0，吸收光的强度为Ia，透过光的强度为It，反射光的强度为Ir，则: I0＝Ia ＋ It ＋ Ir 在吸光光谱分析中，由于采用同样质料的比色皿进行测量，反射光的强度基本上相同，其影响可以相互抵消，上式可简化为: I0＝Ia ＋ It 透光率或透光度:透过光的强度It与入射光的强度Io之比，用T表示。 T＝ It / Io 吸光度A：单色光通过溶液时被吸收的程度，其定义为入射光的强度Io与透射光的强度It之比 A＝ l