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大肠埃希菌连续划线法是一种常用的菌落计数方法,用于估计样品中大肠埃希菌的数量。下面是进行大肠埃希菌连续划线法菌落计数的基本步骤:
样品制备:将待测样品进行适当的稀释,以使菌落数量在可计数范围内。常用的稀释液为生理盐水。
培养基准备:准备适合大肠埃希菌生长的培养基,常用的是MacConkey琼脂培养基。
培养基平板涂布:将稀释好的样品取一定体积(通常为0.1 mL或0.01 mL)分别均匀涂布在已经凝固的培养基平板上。
连续划线:使用已消毒的金属针或线状仪器,在培养基表面连续划线,通常选择4-6条划线。
培养:将培养基平板反转,置于恒温培养箱中,在37摄氏度下培养24-48小时,以促进大肠埃希菌生长。
菌落计数:在培养结束后,观察培养基平板上的菌落,根据菌落的特征(如颜色、大小、形状等),使用放大镜或计数器进行计数。
计算菌落单位:根据涂布的样品体积和稀释倍数,计算出每单位体积的大肠埃希菌数量,常用单位为CFU/mL(菌落形成单位/毫升)。
请注意,菌落计数是一种近似估计方法,可能存在一定的误差。为了获得更准确的结果,建议在实验过程中注意操作的规范性和重复性,并进行多次独立实验。此外,根据实际需要,还可以结合其他的大肠埃希菌检测方法进行验证和确认。
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