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实验七平板菌落计数与接种;平板菌落计数与接种;一、目的要求;二、实验原理;三、实验材料; 四、实验过程;(一)稀释平板菌落计数;4、观察细菌菌落形态以及计数菌落:
培养24 h后,取出培养皿数菌落数,算出同一稀释度三个平板上的菌落平均数,并按下列公式进行计算:
每ml 中菌落形成单位(cfu)=同一稀释度三次重复的平均菌落数×稀释倍数×10
5、计算出每g土壤中细菌的数量:
即用某一培养皿内细菌的菌落数乘以该培养皿接种液的稀释倍数即得。;图-1 菌液逐级稀释过程示意图;第10页/共23页;第11页/共23页;接种方法:
常用的有斜面接种法、平板接种法、液体接种法、试管深层固体培养基的穿刺接种法。
接种工具:
常用的有接种针、接种环、接种钩、接种圈、接种铲或接种锄、玻璃涂棒等。;第13页/共23页;(1)斜面接种法(1支试管/人);将已灼烧过的接种环伸入外侧的菌种试管内。先冷却,而后再用环沾取一定量的菌苔,将沾有菌苔的接种环抽出试管。
迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管的底部,轻轻向上划线(直线或曲线)。
接好种的斜面试管口再次过火焰,棉塞底部过火焰后立即塞入试管内。
将沾有菌苔的接种环在火焰上烧红灭菌。先在内焰中烧灼,使其干燥后,再在外焰中烧红,以免菌苔骤热,使菌体爆溅,造成污染。
放下环后,再将棉塞旋紧,在试管斜面上距试管口2~3cm处贴上标签。
280C恒温培养。;试管拔塞后过火灭菌和取菌;斜面划线法(a)和不同细菌直线接种长出的菌苔形态(b);(2)液体接种法(1支试管/人);(3)穿刺接种(1支试管/人);图4-8 穿刺接种:(a)水平穿刺接种;(b)垂直穿刺接种;五、实验任务;六、思 考 题;感谢您的欣赏
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