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PCR反应原理及其操作生物化工韩 栋
? 试管中进行的DNA复制反应，依据①DNA半保留复制的机理；②体外DNA分子于不同温度下可变性和复性的性质；? 通过人为控制体外合成系统的温度，使①双链DNA变成单链，②单链DNA与人工合成的引物退火，③DNA聚合酶使引物沿着单链模板延伸为双链DNA。
? 4种dNTP混合物 各200umol/L? 引物 各10～100pmol? 模板DNA 0.1～2ug? Taq DNA聚合酶2.5u? Mg2+ 1.5mmol/L
? 1.变性：高温使双链DNA解离形成单链（94℃，30s）。? 2.退火：低温下，引物与模板DNA互补
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