EJT 954-1995胰岛素放射免疫分析试剂盒.pdf

EJ中华人民共和国核行业标准EJ/T 954-95胰岛素放射免疫分析试剂盒1995-07-05 发布1995-11-01 实施中国核工业总公司发布 中华人民共和国核行业标准EJ/T 954-95胰岛素放射免疫分析试剂盒主是内容与适用范围本标准规定了胰岛素放射免疫分析试剂盒的技术条件及检验方法等。本标准适用于双抗体-豪乙二醇法的胰岛素放射免疫分析试剂盒，也适用于其它免疫沉淀剂为分离剂的胰岛紊放射免疫分析试剂盒。2 引用标准GB 11806放射性物质安全运输规定EJ/T 804 放射性同位素产品代号3 产品代号及试剂金的组成3.1产品代号根据EJ/T804规定，编写产品代号。胰岛素放射免疫分析试剂盒的代号为:RIA I 125 5 02 X3.2试剂盒的组成及主要试剂特性3. 2. 1试剂盒的主要组成如下：a.1251-胰岛素;b.胰岛素标准品;c.抗胰岛素抗体;d.温育液；e.第二抗体,f.聚乙二醇(PEG)。3.2.2主要试剂特性如下：a.标记抗原比活度:22. 4~44. 4GBq · μmol-1(100~200)μGi * μg-1)放射化学纯度：不小于90%b.胰岛素标准品应用国衰标准品标定，标准品的标定值与国家标准品的标示值偏差不超过士10%。c.抗胰岛素抗体亲和常数:K≥1×10°L·mol-i交叉反应:与人和猪胰岛素交叉反应为 100% ,与胰高血糖素交叉反应小于 0. 1% 。中国核工业总公司1995-07-05批准1995-11-01 实施1 4 技术指标4.1 灵敏度最小检出值不尖手2.5mIUL-i4. 2 非特异结合率(NSB）应不大于 5%。4. 3 最大结合率(B.)应在 40%～70%之间。4. 4 精密度用变异系数(CV)表示。批内 CV不大于10%（n≥10)，批间 CV不大于13%(n≥10)4. 5准确度在一次测定中，低、中、高三个剂量的质量控制血清测定值，均应在允许范围X士2SD)内。4.6 回收率(R）应在90%～110%之间。4. 7 相关系数 r 和有效剂量值 ED剂量响应曲线的相关系数 r 的绝对值应不小于 0. 99。有效剂量ED25、ED50、ED75值(即结合率分别为 25%、50%、75%时的对应值）应在测定范围内,其变化均应在X ±2 SD 范内。4. 8 测定范围推荐在 2.5～160mIU·L~1之间。4.9 有效期在 2～8℃条件下贮存，从生产日期计算有效期为五周。5 检验方法按附录 A(补充件)实验程序操作，也可用其它等效方法。5. 1 灵敏度的测定按附录 A 实验程序操作。求出零管结合率(B,)的标准差 SD(n:≥10),以零管结合率的均值减去 2 SD所得结合率的相应剂重值,即为试剂盒的灵敏度。5.2NSB的测定取两支放免试管，分别加入与待测样品和抗胰岛素抗体相同体积的温育液及125I-胰盘素,然后按附录 A 实验程序操作。NSB 按公式(1)计算。NsB[(C:-Ci)/(C,-Ci)X100%(1)式中,C一非特异管计数率,计数/min ,.C,一二仪器本底计数率,计数 /mins2 EJ/T 954--95C.总放射性管计数率,计数/ min 。.5.3 B。的测定按附录 A 实验程序操作,B。按公式(2)计算:Br(C,-C.) /(C, -C.)J× 100%2)式中:C。——零标准管计数率;计数 / min 。5. 4 精密度的测定精密度用样品测定值的变异系数表示。按附录 A 实验程序操作,CV 按公式(3)计算。CV = (SD/X) X-100%(3)式中: SD——n 次测定胰岛素值的标准差;X-n(n≥10)次测定胰岛素的均值。5. 5 准确度的测定按附录 A 实验程序操作,用低、中,高三个剂量的质量控制血清测定值计算 SD 。5.6 R的测定在已知胰岛素含量的血样中加入一定量的胰岛素,然后测定血样中总胰岛素含量。按附录 A 实验程序操作，R 按公式(4)计算。R= [(D, -D)/D,J × 100%(4)式中:D,--血样中测得的总胰岛素值,mIU·L-1 Dk—-血样中已知的胰岛素值,mIU·L-1D,—血样中加入的胰岛素值,mIU·L-1。5. 7 剂量响应曲线的绘制及 r 和 ED 值的计算5.7.1曲线的绘制按附录 A 实验程序操作。各标准剂量点的放射性结合物率 B (习惯用 B/B。表示)按公式(5)计算。B=[(C.-C.)/(C。--C.)JX 100% 式中:C.-各标准剂量点结合物(B)的放射性计数率,计数/min。以各标准剂量点的 B 为纵坐标,以各相应的标准剂量点的浓度为横坐标,绘制剂量响应曲线,并求出 r 和 ED值。6 检验规则产品的质量检验分为型式检验和出厂检验两项。6.1 型式检验产品投产前