重组人5型腺病毒联合RNA干扰治疗恶性肿瘤的研究的开题报告.docxVIP

重组人5型腺病毒联合RNA干扰治疗恶性肿瘤的研究的开题报告 一、研究背景 恶性肿瘤是严重危害人类健康的疾病之一，常规的治疗方法包括化疗、放疗和手术等。然而，这些方法在部分患者中并不能达到有效的治疗效果，同时还会对患者的身体造成一定的损害和不适。因此，越来越多的研究者开始尝试采用新的治疗手段来对抗恶性肿瘤。 重组人5型腺病毒和RNA干扰技术是近年来研究比较热门的治疗方法。其中，5型腺病毒是一种具有高效传递基因的载体，可将目标基因导入到肿瘤细胞中，从而达到治疗效果。RNA干扰技术则是通过靶向特定的基因，抑制其表达量，从而达到抑制癌细胞增生的目的。 因此，本研究旨在探究重组人5型腺病毒联合RNA干扰治疗恶性肿瘤的可行性及其治疗效果。 二、研究目的 通过对恶性肿瘤细胞中多个关键基因的干扰，探究重组人5型腺病毒联合RNA干扰对恶性肿瘤的治疗效果，为临床治疗提供新的治疗思路和方法。 三、研究内容 1. 构建重组人5型腺病毒载体并进行鉴定：根据目标基因的序列设计合适的shRNA序列，将其克隆到基因慢病毒载体中，经过PCR扩增、测序和限制酶酶切等方法进行鉴定。 2. 制备重组人5型腺病毒：将构建好的基因慢病毒载体转染到293T细胞中，通过超声震荡和离心等方法制备重组人5型腺病毒。 3. 体外实验：将肿瘤细胞培养于培养皿内，将制备好的重组人5型腺病毒加入到细胞培养液中，以不同浓度处理不同时间，通过Western blot和RT-PCR等方法检测不同基因的表达情况。 4. 动物实验：采用nude mice模型，构建肿瘤移植瘤模型，将制备好的重组人5型腺病毒注入模型中，观察药物对肿瘤生长的抑制作用。 四、研究意义 本研究通过采用新型的治疗手段和方法，探究重组人5型腺病毒联合RNA干扰治疗恶性肿瘤的可行性及其治疗效果，为临床治疗提供新的治疗思路和方法，具有重要的临床应用价值。