LS_T 6130-2017粮油检验 粮食中伏马毒素B1、B2的测定 超高效液相色谱法.pdf

ICS 67.040x 11LS中华人民共和国粮食行业标准LS/T 6130—2017粮油检验粮食中伏马毒素B1、B2的测定超高效液相色谱法Inspection of grain and oils—Determination of fumonisins B,,B2 in grains-Ultra-high performance liquid chromatography2017-10-27发布2017-12-20实施国家粮食局发布 LS/T 6130—2017言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草，本标准由国家粮食局提出。本标准由全国粮油标准化技术委员会(SAT/TC270)归口。本标准起草单位：国家粮食局科学研究院、安徽国家粮食质量监测中心、黑龙江粮油卫生检验监测站、期南国家粮食质量监测中心、递宁市粮食质量监督检验站、北京农业质量标准与检测技术研究中心。本标准主要起草人：谢刚、黎容、李丽、叶金、王松雪、吴字、胡斌、徐春锋、许艳霞、李小明、李森、随安祥， LS/T 6130—2017粮油检验粮食中伏马毒素B，、B2的测定超高效液相色谱法1范围本标准规定了粮食及其制品中伏马毒索B、B超高效液相色谱法测定的原理、试剂与仪器设备、分析步骤、结果计算等内容。本标准适用于粮食及相关制品中伏马毒素B、B；的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件，GB/T602化学试剂杂质测定用标准常液的制备GB/T 5491粮食、油料检验扦样、分样法GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3原理用提取液提取试样中的伏马毒索B、B，经免疫亲和柱净化、高集后，用邻苯二甲醛衍生，超高效液相色谱荧光检测器测定，外标法定量，试剂和仪器设备除另有规定外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中一级水的要求。4.1试剂4.1.1甲醇(CH,OH)：色谱纯，4.1.2乙晴(CH,CN)，色谱纯，4.1.3四硼酸钠(Na;B,O,·10H,O)；分析纯。4.1.4氧化钠(NaCI)：分析纯。4, 1.5磷酸氢二钠(Na,HPO,）分析纯。4,1.6磷酸二氢钾(KH,PO,）：分析纯。4.1.7氯化钾(KCI)：分析纯。4,1.8浓盐酸(HCI)：分析纯，4,1.9乙酸（CH,COOH)：色谱纯。4.1.10邻苯二甲醛(OPA,C,H,O,)：分析纯。4.1.112-硫基乙醇(C,H,OS)；分析纯。4.1,120.1mol/L四霸酸钠溶液，称取3.8g四硼酸钠（4.1.3)，用水溶解并定容至100mL。1 LS/T 6130—20174.1,132mol/L盐酸落液：将1体积浓盐酸(4.1.8)溶解在5体积水中4.1.14乙脂水液（50十50)；取50体积乙睛（4.1.2)加人50体积水。(4.1.6)、0.2g氢化钾(4.1.7)溶解于990mL水中，用2mol/L盐酸溶液(4.1.13)调节pH为7.0,最后定容为1 L。4.1.161%乙酸水溶减；量取99体积水，加人1体积乙酸（4.1.9)。4.1.17衍生溶液：取40mg邻苯二甲醛(4.1.10)加人1mL甲醇(4.1.1)溶解，加人0.1mol/L四硼酸钠落减(4.2.1)5mL帮释，加人2-硫基乙醇（4.1.11)80μL，混匀。过0.22pm泌膜后，存于具塞棕色瓶中，在室温避光处可储藏1周。4.1.182%乙酸化甲醇：量取98体积甲醇(4.1.1)，加人2体积乙酸(4,1.9)。其他试剂应符合GB/T602的要求。4,2标准品4.2.1伏马毒索B；和B，标准品：晶体，纯度95%；或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。4.2.2(4.2.1)，用乙睛水溶液(4.1.14)溶解，配成伏马毒素B:、B浓度均为100mg/L的标准储备液，一20C避光保存。4.2.3伏马毒素混合标准溶液：准确吸取适量伏马毒素B;、B，标准储备液（4.2.2），用乙睛水露液4.2.4伏马毒索标准工作液：分别取适量伏马毒索混合标准溶液（4.2.3)，用乙睛水溶液（4.1.14)稀释，/00*s/00/00/00/0/10标准工作液。4.3材料与仪器设备4.3.1快速定性滤纸：$12cmWhatman4号，或性能相当者。4.3.2滤膜：0.22μm，有机系，4.3.3玻璃微纤维滤纸：$9cmWhatmanGF/A，或性能相当者。4.3,4伏马毒素免疫亲和柱：对伏马毒素B和B，均有100%的交叉反应性，4.3.5注射器；20mL4.3.6离心管，10mL.50mL，4.3.7三角瓶；250mL，4.3.8量筒：100mL，10mL4.3.9天平：感量0.1g和0.