DB37_T 2274-2013辣椒白粉病诊断及检测技术标准.pdf

ICS 65. 020B 16DB37山 東东省地方标准DB37/T2274—2013辣椒白粉病诊断及检测技术标准The standard for diagnosis and prediction of pepper powery mildew2013-04-01发布2013-05-01实施山东省质量技术监督局发布 DB37/T 言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草本标准山东省农业标准化技术委员会提出并归口本标准起草单位：山东农业大学。本标准主要起草人：张修国、李壮、付丽。I DB37/T 2274—2013辣椒白粉病诊断及检测技术标准1范围本标准规定了辣椒白粉病病害诊断及检测技术。本标准适用于辣白粉病不同生育期症状描述，病害标本采集，室内干制标本保存，温室内活菌繁殖技术，致病性测定技术，病害发生流行与气候因子关系分析，病菌分子检测技术。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2. 1辣椒白粉病Pepperpowerymildew由鞑粗内丝白粉菌（LeveillulatauricaL.）其无性型为拟粉孢菌（oidiopsistaurica）所引起的主要为害辣概叶片，病叶正面呈黄绿色至黑褐色不规则病斑，背面密生白色至灰色粉状毒层症状，2. 2病状symptom of a disease辣椒病部所显示的异常特性，如叶片正面呈黄绿色不规则斑块，无清晰边缘，2. 3病征symptom of a disease辣椒病部病部出现病菌子实体，如叶背面密生白粉状霉层。2. 4接种体inoculum用于接种引起辣椒白粉病发生的病原物或病原物的一部分，2. 5 接种悬浮液inoculum suspension用于辣椒白粉病接种含有定量接种体的液体，2. 6人工接种artificial inoculation在适宜条件下，通过人工操作技术将病菌接种体置于辣概适宜部位并使之发病的过程，1 DB37/T 227420132. 7致病性pathogenicity辣椒白粉菌对辣椒寄主的破坏作用和引起植物发生病变的能力，2. 8病情指数diseaseindex(DI)病情指数（缩写为D1）又叫发病指数、感染指数，与发病率一样是表示发病程度的一种方法。发病率是指一个群体中发病的多少，用百分率表示，病情指数（DI）是根据一定数目的植株或植株器官各病级（把植株或植株某一器官感染病害轻重程度划分为等级称为病级）核计其发病株（器官）数所得平均发病程度的数值。3仪器及试剂带光源扩大镜、双目解削镜(10x～50x)、显微镜(100x~1000x）、乳酚油、乳酚油配制：苯酚结晶（水浴加热落化)20mL、乳酸20mL、甘油40mL，蒸溜水20mL混合而成。4辣椒白粉病病状与病征见附录A。5辣概白粉病病原诊断辣椒白粉病病菌特征见附录A。6辣椒白粉病菌鉴定与致病性测定6.1标本采集采集具典型症状的辣椒白粉病病害标本，尽可能采集到不同大辣椒品种、不同地理区域、不同发病时期及不同发病部位的辣椒白粉病标本，6.2标本制作与保存将标本夹的一扇平放，铺上10～20层吸水性强的纸（草纸或旧报纸），把标本放在纸上，整形，使枝叶展平，疏密适当，再铺上几层吸水纸，按此层层压制，达到一定数量后，压上另一扇标本夹，用绳拥紧，置干燥通风处晾晒。前3d每天早晚各更换一次吸水纸，3d后每天更换一次，注意检查，防止标本发毒，1周后将标本干燥后压好。然后用专柜保存标本，按类放好。标本柜要放在干燥处，内置棉脑球，注意检查，避免标本发毒、虫蛀。6.3病叶检查检查辣椒叶片有无白粉病及可疑症状，叶片背面是否密生白色至灰色粉状霉层。6.4病原菌检测2 DB37/T 227420136.4.1直接检测用挑针挑取病斑背面粉状霉物制片镜检，显微镜观察有无病菌分生孢子梗和分生孢子，描述、记录分生孢子梗和分生孢子形态特征，必要时分别测量其大小（见附录A）。6.4.2诱发培养检验将未发现辣椒白粉病的可疑辣椒叶片，置于大小为50×90cm的瓷盘中，铺多了圆形灭菌滤纸片，加无菌水侵透滤纸片，放置可疑疑辣粮叶片，用塑科膜密封，放置于20C23℃培养箱内培养，间隔24h用挑针挑取可疑辣椒叶片上是香长出白色霉状物，制片镜检，显微镜观察有无病菌分生孢子梗和分生孢子，描述、记求分生孢子梗和分生孢子形态特征，必要时分别测量其大小，至少检查15个可疑辣椒叶片。6.5致病菌性测定技术6.5.1接种体制备在接种前需要进行病原物接种体的繁殖，常用繁殖方法为，在温室内用干净毛剧刷取采集的典型病叶表面新鲜分生孢子接种于感病辣椒品种的叶片上，适宜条件紧殖产生大量分生孢子。或用干净毛例刷取病叶上的新鲜分生分孢子于盛有无菌水烧杯中，再滴加1000μg/mL十二烧基硫酸钠（SDS)，高速揽拌（1200r/min）3min5mi