DB37_T 2036-2012奶牛隐性乳腺炎诊断技术.pdf

ICS 11. 220B 41DB37山長东省地方标准DB 37/T 2036—2012奶牛隐性乳腺炎诊断技术Diagnostic Criteria on subclinical mastitis of dairy cattle2012-02-09发布2012-03-01实施山东省质量技术监督局发布 DB37/ 2036—2012前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山东省农业科学院提出。本标准由山东省畜牧业专业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省农业科学院奶牛研究中心、山东省动物疫病预防与控制中心，本标准主要起草人：杨宏军、田夫林、何洪彬、侯明海、仲路峰。I DB37/2036——2012奶牛隐性乳腺炎诊断技术1范围本标准规定了奶牛隐性乳腺炎诊断技术的操作要求。本标准适用于奶牛陷性乳腺荧的诊断。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件，GB19301-2010食品安全国家标准生乳GB 194892008实验室生物安全通用要求NY/T 8002004生鲜牛乳中体细胞数测定方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件，3. 1隐性乳腺炎 Subclinical Mastitis无肉眼可见临床症状的乳腺症。可使乳产量下降10%～15%，降低乳中乳脂、乳糖含量，乳中体细胞数显著升高，乳汁的H、导电率、氯化物含量等明显升高，产重影响牛乳品质，无法满足生乳质量要求（参照GB19301-2010）。4仪器及试剂4.1仪器设备全自动体细胞计数仪（测定参照NY/T800-2004）4.2试剂隐性乳腺炎诊断试剂：十二烷基苯磺酸钠15%、氢氧化钠6.3%、选氮化钠0.2%、溴甲酚紫5%、水73.5%。5检测方法5.1体细胞计数5.1.1采样5. 1. 1. 1采样数量及比例 DB37/ 2036—2012每头牛采样量为40mL，三次挤奶按4:3:3比例取，两次挤奶按6:4比例取样。5.1.1.2取样打开计量瓶底部放奶口，让空气进入35秒，使牛奶充分混匀后，接取规定数量的奶样。上下颠倒采样管2～3次，使牛奶与防腐剂（重铬酸钾）完全混勾，在采样管顶盖写上牛号，5.1.1.3奶样的购存与运输检查采样管顶盖是否扣紧、有无泄漏、奶样与防腐剂是否完全混合等，装入采样箱，立即运输到检测中心；需短时贮存，应放在通风阴凉处，或置于冷藏室（2℃～7℃），时间不超过7天。5.1.2测量5.1.2.1牛号记录检查全部样品，记录采样管上的牛号，然后按牛号记录先后安排测定顺序。5. 1.2. 2样品预热水浴温度设定为42C，待水温稳定后，将记求好的样品放入水槽中1520分钟。5.1.2.3测样体细胞计数仪开机调零后，输入牛场名称和样品数量。按牛号记录顺序将样品摆放在测样架上，打开瓶盖放入轨道，点击开始按钮，仪器由待机状态进入测样状态，开始测样，即可获得乳汁体细胞数结果。5.1.2.4清洗一般每隔1h清洗并校零1次，也可根据需要及时清洗。当天样品测定完毕后，用清洗液清洗仪器。5.2化学检验法5.2.1采样体细胞计数超过50万/毫升的奶牛个体，将四个乳区分别擦洗干净，然后每个乳区手工挤奶，并弃掉前三把乳汁，将每个乳区乳汁分别挤入洁净的采样瓶内，并做好乳区标记，立即测定。5.2.2测定取新采集奶样5叫L，放入隐性乳腺炎诊断托盘中，再加入等量的陷性乳腺炎诊断试剂，成同心因方间摇动15秒，根据测试乳样是否出现沉淀或凝胶及颜色变化进行结果判定（见表1）：2 DB37/ 2036—2012表1化学诊断试剂结果判定标准诊断试剂反应酷果测试乳样混合均匀，不出现任何沉淀，落液呈浅紫红色。阴性测试乳样有微量沉淀出现，据动后消失，溶液呈紫红色可疑测试乳样有少量沉淀出现，掘动后不消失，溶液呈深紫红色。弱阳性测试乳样中有多量胶状沉淀出现，掘动时向中心聚集，溶液呈终紫红色。阳性测试乳样速形成股状沉淀，据动时中心凸起，粘着盘底，落液呈绎锋紫色。强阳性6结果判定本标准推荐：检测牛乳体细胞数在50万个/毫升以上，同时隐性乳腺炎检测显示阳性结果，即可判为隐性乳腺炎。实验室操作及废弃物处理参照GB19489-2008要求执行。3