史上最详细教程一文带你精通WB从条带处理到数据分析（上）.docVIP

史上最详细教程一文带你精通WB从条带处理到数据分析（上） 准备工具 1.Photoshop ? ?2.Image J ? 3. SPSS ? ?4. GraphPad Prism 6 如果你拿到的是蓝色的条带，如下图： 那我们就需要变个色，弄成黑白的。然后制作成待发表用的图片。当然有些小伙伴现在用化学发光仪曝光的，WB条带就是黑白的，处理起来就方便一点。 01 去色 文件→打开图片，图像→调整→去色 02 新建画布 文件→新建 画布大小：高度，宽度建议大于10厘米，15厘米都可以，画布建大了没关系，后面可以剪切，建小了不方便操作。 03 复制，粘贴条带 矩形选择工具选择条带，然后快捷键：Ctrl+C，复制所选的条带，Ctrl+V，粘贴到刚才新建的画布上。 04 调整条带大小 我们有时候复制过来的条带不一样大小或者不齐，这个时候我们就需要调整，快捷键：Ctrl+T，拉拽条带至合适大小即可。 05 添加文字标注 条带对齐之后，要给条带做标注。选择横排文字工具。上面菜单栏可以调节字体的大小，字体，颜色。字体我们一般选择Times New Roman，适用于发表的要求。 06 合并图层 让刚才做好的几个图层合并成一张图片。这里先保存一张TIF格式的图片（包含所有图层），方便以后修改。文件→另存为。 调节图片亮度/对比度，可以自己慢慢调整到适当数值，让条带更好看。 （调整前） （调整后） 07 裁剪图片 注： 1.在合并图层要先保存tif格式的图片，方便以后修改； 2.保存为jpg格式是用于发表用的。 08 Image J 得到了做好的WB图片后要测条带的灰度值，当然Photoshop也可以测量灰度值，我个人觉得用Image J更专业也比较方便。（实际上是我不会，O(∩_∩)O哈哈~） 09 Image J测WB条带灰度值 打开图片：file→open 10 扣除背景影响 Process→Subtract Background Rolling ball radius：50，light background，让背景变白一点，因为我们的条带是黑的。 11 设置测量参数 Analyze→Set Measurements。勾选Area，mean gray value，min and max gray value,integrated density。 12 设置单位 Analyze→set scale。Unit：pixel。 13 反转条带颜色 edit→invert 14 选择要测量的条带，选好后测量 Analyze→measure，当然你也可以使用快捷键：Ctrl+M。 15 如步骤14测量好之后导出数据 File→save as ，直接默认保存即可。数据结果可以用Excel打开。 下一期再教大家如何用GraphPad Prism 6做WB结果的柱状图，和用SPSS分析WB的统计数据。因为在一期全部做的话，内容太多，图片也多。