WST 57-1996尿中对硝基酚的分光光度测定方法.pdf

中华人民共和国卫生行业标准尿中对硝基酚的分光光度测定方法WS/T57-1996Urine-Determination of 4-nitrophenol-Spectrophotometric method1主题内容与适用范围本标准规定了尿中对硝基酚的分光光度测定方法。本法最低检测浓度为0.2mg/L。本标准适用于接触硝基苯类化合物工人尿中对硝基酚含量的测定。2原理尿中对硝基酚以游离形式或与葡萄糖醛酸、硫酸等结合存在，尿样经水解后，结合的对硝基酚转化为游离形式，用有机溶剂萃取对硝基酚，再反萃取至氨水中，用三氯化钛将对硝基酚还原成对氨基酚，与邻甲酚作用，生成靛酚蓝，于波长620nm处比色定量。3仪器3.1分光光度计，20mm比色杯。3.2比色管，25mL，10mL，具磨口塞。3.3水浴锅，100℃。3.4分液漏斗，100mL。3.5聚乙烯塑料瓶，50mL以上。3.6尿比重计。4 试剂本标准所用试剂除另有说明外，均为分析纯试剂。4.1实验用水，蒸馏水或具有同等纯度的去离子水。4.2盐酸，Pzo=1.19g/mL。4.3氨水，3mol/L。取浓氨水50mL加水稀释至250mL。4.4有机溶剂萃取液：1%（V/V)异戊醇溶液（溶剂为4+1石油醚和乙醚的混合物）。4.5邻甲酚溶液，20g/L，称取邻甲酚2g，溶于100mL0.2mol/L氢氧化钠中。4.6三氯化钛溶液：取150～200g/L的三氯化钛溶液1mL，加蒸馏水至8mL，临用前配制。 WS/T57-1996保存三天。6分析步骤6.1样品处理6.1.1吸取已经测定比重的尿样5.0mL于25mL比色管中，加5mL水，再加2mL盐酸（4.2)混匀，加盖，置于沸水浴中加热1h（加热不久，应松开盖1～2次），放冷至室温。6.1.2将样液倒入100mL分液漏斗中，加入25mL有机萃取液，置于振荡器上强烈振摇10min，静置分层，去掉水层。有机层用5.0mL氨水（4.3)强烈振摇3min，静置分层，将氨水层放入干燥的比色管中。6.2标准曲线的绘制6.2.1取6个比色管，按下表配制标准管。对硝基酚标准管的配制0123456管号00. 10. 20. 61. 01. 52. 0标准应用液（4.7)，mL10. 09. 09. 89. 49. 08. 58. 0水,mL100261520对硝基酚含量,ug1各管加2mL盐酸（4.2)，混匀，加盖，于沸水浴中加热1h，放冷。6.2.2按6.1.2继续操作。6.2.3于比色管中加入1.0mL邻甲酚溶液（4.5)混匀，再加入1mL三氯化钛溶液（4.6），立即振摇至黄色沉淀变成淡黄色沉淀为止，将显色液用滤纸过滤于10mL比色管中，30min后，以试剂空白为参比，于620nm处，用20mm比色杯比色定量。6.2.4以对硝基酚含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。6.3样品测定将6.1.2条制备的氨水层样品溶液，按6.2.3条操作，测量吸光度，在标准曲线上查出样品溶液中对硝基酚含量。在测定前后以及每测定10个样品后，测定一次质控样。7 计算7.1按式(1)计算尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度校正系数(k)。1.020-1.000k=(1)实测比重－1.0007.2按式(2)计算尿中对硝基酚的浓度。mX=×k:(2)式中：X尿中对硝基酚浓度,mg/L;m—由标准曲线上查出的对硝基酚含量，μg;V.一分析时所取尿样体积，mL。8说明8.1本法的最低检测浓度为0.2mg/L；测定范围1~20μg；精密度：CV=3.1%~9.7%（尿中对硝基酚浓度0.4，1.2,2.0mg/L，n=6)，准确度，尿样加标回收率=92.2%～96.0%（加标量6.0~10μg）。8.2采集接触者的班后尿样，采尿样时要脱离现场环境，换工作服，洗手，以防止现场的对硝基酚污染。 WS/T57-19963加三氯化钛溶液以后，一定要振摇至黄色沉淀变成浅黄色沉淀为止，显色后的溶液用滤纸过滤后，8.3于3mol/L的碱度条件下，30min就可显色完全，颜色在120min内保持稳定。不今对硝其耐的昆样当比重左1012～1025之间时.品样木直空白值对测定结里的影响可勿整QA