SN 1439-2004国境口岸埃博拉出血热检验规程.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1439—2004国境口岸埃博拉出血热检验规程Examination codes for ebola hemorrhagic fever at frontier port2004-06-01发布2004-12-01实施中华人民共和国发布数码防伪国家质量监督检验检疫总局11 SN/T 1439—2004前言本标准的附录 C、附录 D 为规范性附录,附录 A、附录 B为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国海南出人境检验检疫局、中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准主要起草人：黄廷学、黄健民、关淳、吴波、黄春德。本标准为首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1439—2004国境口岸埃博拉出血热检验规程1范围本标准规定了国境口岸埃博拉出血热的检验对象、方法、结果报告程序及阳性结果的处置原则。本标推适用于国境口岸的埃博拉出血热实验室检验。2 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2.1埃博拉出血热 ebola hemorrhagic fever由埃博拉病毒引起的一种对人类生命健康威胁极大的烈性传染病。主要通过与病人及其排泄物等接触传染，也可通过气溶胶传播。3 对象3.1在人境人员中发现的埃博拉出血热染疫人及染疫嫌疑人。3.2灵长类动物（来自埃博拉出血热地区）。3.3人体组织和器官(来自埃博拉出血热地区)。4标本的采集和处理4. 1 病人血清早期病人血液标本(在发病3d内)及第二次血液标本(在3周后)采集，冷藏条件下迅速送实验室，当日分离血清。如不能立即做细胞培养，血液标本应放人超低温冰箱（一80℃)或液氮罐内保存。4.2病人体液、排泄物采集病人体液、排泄物（包括尿液，精液，阴道、直肠、鼻腔、口腔、眼结膜分泌物)等在冷藏条件下迅速送至指定实验室，做病毒分离或其他检测用。4.3组织标本采集死亡病例(灵长类动物)含有汗腺的皮下组织、肝脏、脾脏等，在冷藏条件下迅速送至指定实验室，做病毒分离或其他检测用。4.4标本标识与实验样品转运4.4.1标本标识采集的标本应进行标识，连同相关记录一并送实验室。4.4.2实验样品转运实验样品转运过程应遵循下列原则：-所有需要转运的实验样品必须标明“传染性物质，埃博拉病毒”；-短途运输必须使用专车，由专人运送。尽可能避免长途转运，如确需要空运的实验样品应按照有关部门对传染性物品运输的规定办理；样品的容器要使用能够承受不少于95kPa压力的高质量的防水包装材料并且密封，以防止运输过程中发生内容物的外泄；第二层和第三层包装中应使用吸水性好的柔软物质充填；1 SN/T 1439—2004-几个易碎的容器在同一个包裹中运输时，应分别独立包装并相互隔离，以免相互碰撞。5准备常用仪器设备和器材参见附录A，常用溶液及配制参见附录B。6检验方法埃博拉出血热实验室的检验方法如下：-电子显微镜检查；-埃博拉病毒抗原检测；病毒分离鉴定；病毒核酸分子检测;特异性抗体检测。检验方法的详细内容遵照附录 C。根据实验室设备条件及技术力量，选择使用上述检验方法，但其中应包括病毒学检验和抗体检测方法中一项至两项。生物安全及防护措施7埃博拉出血热实验室的生物安全及防护措施按照附录D的规定操作。8检验结果报告8.1电子显微镜检查电镜法检查阳性，报告为“检出丝状病毒颗粒”，应采用免疫电镜技术做进一步鉴定。8.2埃博拉病毒抗原检测双抗体夹心抗原捕获ELISA法对(血液、尿液、及皮下组织悬液)标本检测阳性，报告为埃博拉病毒抗原阳性”。8.3 病毒分离鉴定将含病毒材料接种细胞培养，出现明显细胞病变，并经间接免疫荧光法(IFA)鉴定证实，报告为“检出埃博拉病毒”，可以确诊。8.4病毒核酸分子检测用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法从(病人或病兽标本)中检测到埃博拉病毒特异性GP基因,报告为检出埃博拉病毒特异性 GP基因”,可以确诊。8.5单份血清检测单份血清标本特异性IgM抗体1：40以上，报告为埃博拉病毒IgM抗体阳性”结合临床表现具有诊断意义。8.6双份血清检测患者双份血清特异性抗体检测，恢复期血清抗体效价较急性期增高四倍及以上时，报告为“埃博拉病毒抗体阳性”,可以确诊。8.7间接免疫荧光试验(IFA)单份血清标本1：64稀释呈阳性或双份血清效价增高四倍及以上时，报告经间接免疫荧光试验证实为“埃博拉病毒抗体阳性”，可以确诊。8.8 免疫印迹试验(IBT)待检血清标本经免疫印迹试验同时出现 NP和VP30或NP和VP24显色区带，报告为埃博拉病毒抗体阳性”,可以确诊。2 SN/T 1439—20049阳性结果的处置对病毒分离株及其他阳性结果的相应标本应送有资质的实验室做复检或鉴定。阳性结果应及时向上级主管部门报告。 SN/T 1439—20