SN 1407-2004进出口2.5%溴鼠隆母液有效含量的测定方法 高效液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1407-2004进出口2.5%溴鼠隆母液有效含量的测定方法高效液相色谱法Determination of active content of 2. 5% brodifacoum mothersolution for import and exportHPLC2004-06-01发布2004-12-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪”， SN/T 1407—2004前言本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国天津出人境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：刘绍从、胡新功、吕刚、刘军、张莱。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。I SN/T 1407-2004进出口2.5%溴鼠隆母液有效含量的测定方法‧高效液相色谱法1 范围本标准规定了利用高效液相色谱法测定2.5%溴鼠隆母液有效含量的方法。本标准适用于2.5%漠鼠隆母液的有效含量的测定。有效成分：3-[3-(4-溴联苯-4-基)-1,2,3,4-四氢-1-萘基]-4-羟基香豆素(IUPAC),3-{3-［4-bromo-(1 , 1 *-biphenyl)-4-yl}-1 , 2, 3, 4-tetrahydronaphtalenyl)-4-hydroxy-2H-1-benzopyran-2-one(CA;56073-10-0)结构式：31OH分子式:C3t H23 BrO3相对分子量：523.4（按1995年国际原子量）2方法提要试样用丙酮溶解，以流动相定容,用 5 um ODS(C18)为填料的液相色谱柱分离试样,用紫外检测器(254 nm)检测,外标法定量。3试剂和溶液3.1 甲醇：色谱纯。3.2冰乙酸：优级纯。3.3pH=4.0 乙酸-乙酸钠缓冲溶液：称取 NaAc·3H,0 20 g，溶于适量水中，加 6 mol/L HAc134 mL,稀释至 500 mL。3.4流动相：甲醇：pH=4的乙酸-乙酸钠缓冲溶液,90：10(体积分数)。3.5丙酮：优级纯。3.6 二级蒸馏水。3.7溴鼠隆标准品：已知含量≥99.0%。4 仪器4.1高效液相色谱仪：具有可变波长的紫外检测器。4.2色谱柱：250mm×4.6mm内径)不锈钢柱，内装 C18填充物,粒径5μm。4.3进样阀:20 μL4.4超声波清洗器。 SN/T 1407—20045高效液相色谱仪条件测定时高效液相色谱仪操作条件如下：流速:l.0 mL/min,柱温：20℃～35℃,检测过程中温度波动不应大于2℃;检测波长：254 nm;进样体积：20uL。土述操作条件是典型的，可根据不同仪器特点，对色谱柱(采用C18类液相色谱柱)和给定操作条件作适当调整，以获得最佳效果。上述操作条件下的典型色谱图参见图A.1。6测定步骤6.1标准溶液的配制称取溴鼠隆标准品 0.06 g(精确至 0.0002 g)，置于50mL洁净、于燥的容量瓶中,加人 3.5 mL丙酮。将容量瓶放人超声波清洗器，标准品完全溶解后，用流动相稀释并定容，充分摇匀（A溶液）。精确移取 5mL A溶液于另一个50 mL 洁净、干燥的容量瓶内，用流动相稀释至刻度，摇匀，密封保存(B溶液）。6.2试样溶液的配制称取试样0.25g(精确至0.000 2g),于50mL洁净、干燥的容量瓶中,加入3.5mL丙酮,在超声波清洗器中溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀(C溶液）。6.3　测定在上述色谱条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标准溶液（B溶液），直至相邻两针的峰面积变化小于1.5%时，按照标准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进行测定。7 计算将测得的两次试样溶液(C溶液)及试样前后两次标准溶液(B溶液)中溴鼠隆的峰面积进行平均。试样中溴鼠隆的质量百分含量X按式(1)计算：AzmPX=(1)10Aim2式中:X一一试样中溴鼠隆的质量百分含量，%;A1——标准溶液中溴鼠隆峰面积的平均值;A2—一试样溶液中溴鼠隆峰面积的平均值;一溴鼠隆标准品的质量，单位为克（g）mt-m2—试样的质量，单位为克(g);P——标准品中溴鼠隆的质量百分含量，%;一溴鼠隆标推样品的稀释倍数。10-8精密度对于2.5%溴鼠隆母液：r0.05,R0.1。2 SN/T 1407-2004附录A(资料性附录)溴鼠隆的典型色谱图tn**.1—溶剂;2-溴鼠隆。附图 A.1 溴鼠隆典型色谱图 002JL/NS中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口 2.5%溴鼠隆母液有效含量的测定方法高效液相色谱法SN/T 1407—2004*中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 www, 电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本880×123