NYT 1445-2007奶牛胚胎移植技术规程.pdf

ICS 65.020.30B 43NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1445-2007奶牛胚胎移植技术规程Procedure of embryo transfer technology in dairy cattle2007-12-01 实施2007-09- 14 发布中华人民共和国农业部发布 NY/T 1445—2007前言为规范我国奶牛胚胎移植技术在推广应用中的操作,满足奶牛胚胎生产与销售的需要,依据GB/T1.1-2000《标准化工作导则第1部分：标准的结构与编写规则》编写本标准。本标准的全部技术内容为推荐性。本标准的附录 A、附录 B、附录 C、附录 D、附录 E、附录 F 为规范性附录,附录 G、附录 H、附录 I 为资料性附录。本标准由北京三元集团有限责任公司提出。本标准由中华人民共和国农业部农垦局归口。本标准起草单位：北京奶牛中心。薛建华吴胜权宣柏华喆赵鹏　李艳华‧麻柱本标准主要起草人：孙凤俊‧张新慧吕善潮‧韩广文等。1 NY/T 1445—2007奶牛胚胎移植技术规程1范围本标准规定了供体牛的选择、超数排卵、人工授精、胚胎采集、胚胎质量鉴定、胚胎冷冻保存与解冻、受体牛的选择与同期发情处理、胚胎移植等技术操作的基本原则、要求和方法。本标准适用于奶牛胚胎移植技术。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB 4143牛冷冻精液NY/T 34-2004奶牛饲养标准3术语和定义下列术语与定义适用于本标准。3.1胚胎移植 embryo transfer,ET将体内外生产的奶牛早期胚胎移植到与其生理状态相同或相近的母牛子宫内,生产优良奶牛后代的技术。4药品、器械和实验室要求4.1试剂和药品所用的试剂和药品及要求见附录 A。4.2设备、器械与环境4.2.1所需的设备与耗材:见附录B。4.2.2器械、设备的清洁、消毒：见附录C。4.2.3胚胎实验室:为胚胎操作专用,应保持室内无菌、无尘,室内温度保持在20℃～25℃,避免阳光直射。4.2.4采胚室：为胚胎采集专用,应保持清洁,地面要防滑,便于清洗、消毒,设有保定栏,与检胚室之间安装传递窗,室内温度不低于15℃。5超数排卵5.1供体选择和超数排卵5.1.1供体牛的选择供体牛应选择遗传性能稳定,系谱清楚,以及个体生产性能优良的奶牛。供体牛要求健康状况良好,体况中等以上,生殖系统和繁殖功能正常,无遗传和传染性疾病。成年母牛要有一胎以上的正常繁殖史,10岁以上的母牛一般不选作供体,青年母牛应在 14月龄以上或达到成年牛体重70%以上。1 NY/T 1445—200超排处理时,供体牛应具有两个正常发情周期,卵巢发育正常、丰满有弹性,并有发育良好的黄体。筛选出的供体牛应在牛体上做好标记,仔细观察发情,并记录耳号和发情时间。5.1.2供体牛的饲养管理　供体牛饲养管理见 NY/T 342004。应提供较高能量日粮标准,并适量补充青绿饲料、维生素 A、维生素 D、维生素 E 和微量元素硒。5.1.3超数排卵处理方法对于发情记录准确的供体母牛，以发情之日为 0 d,在发情后的第 9 d～13 d的任意一天开始连续 4 d 肌肉注射促卵泡素（FSH），每天 2 次，间隔 12 h，,在首次注射 FSH 后 48 h 肌肉注射氯前列烯醇（PG)0.4 mg／头·次。注射 PG 48 h 后观察发情，发情后 12 h 进行人工授精。对直检卵巢上有功能性黄体的供体牛,可肌注 PG0.4 mg/头·次,使其发情排卵,然后在发情后的第 9d～13d进行肌肉注射 FSH,具体方法同 。诱导卵泡波同步发生方法进行超数排卵处理,即在发情周期的任意一天放人含孕激素的阴道栓,具体方法见附录 D(规范性附录),同时肌肉注射 17 β-雌二醇 5mg 或苯甲酸钠雌二醇2 mg 和黄体酮50 mg～100 mg。放置阴道栓 4d后(放阴道栓当天为 0 d),开始连续 4 d 肌肉注射 FSH,每天2次,间隔12 h。在首次注射 FSH 后 48 h 肌肉注射 PG0.4mg/头·次,再间隔 12 h 撤栓。注射 PG后 48 h 观察发情和人工授精。一般情况下,供体牛重复超排,每次处理应间隔60d左右;对于超排效果良好的个体,可采用方法间隔30d左右进行超排处理。不同FSH制剂应根据使用说明来确定用法和用量，使用新厂家或新批号的 FSH 时,应做超排效果预试验。进行重复超排时，应适当增加剂量。5.2供体牛的人工授精5.2.1精液质量应符合GB 4143的规定。人工授精使用的冷冻精液，应根据供