SCT 3028-2006水产品中噁喹酸残留量的测定 液相色谱法.pdf

ICS 67.050B 50Sc中华人民共和国水产行业标准SC/T 3028-2006水产品中恶喹酸残留量的测定液相色谱法Determination of oxolinic acid residues in aquatic productsLiquid chromatography method2006~10-01实施2006-07~10 发布中华人民共和国农业部发布 SC/T 3028—2006前言本标准附录 A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会归口。本标准起草单位：国家水产品质量监督检验中心。本标准主要起草人：李兆新、耿霞、冷凯良、王慧、刘晋湘、王联珠、李晓川。I SC/T 3028—2006水产品中喹酸残留量的测定液相色谱法1范围本标准规定了水产品中喹酸残留量的液相色谱测定方法。本标准适用于水产品可食部分中喹酸残留量的测定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理水产品样品中喹酸用乙酸乙酯提取,浓缩后,用流动相溶解残渣，正已烷脱去脂肪,利用嗯喹酸的荧光性质，采用具有荧光检测器的液相色谱仪检测，外标法定量。4 试剂除另有规定外,所有试剂均为分析纯，试验用水符合GB/T6682一级水要求。4.1乙酸乙酯:取无水硫酸钠25g于 500mL乙酸乙酯中,摇匀,放置清晰即可。4.2正已烷。4.3乙睛：色谱纯。4.4四氢呋喃：色谱纯。4.5无水硫酸钠：650℃灼烧4h,冷却后贮存于密封容器中。4.60.03mol/L氢氧化钠溶液：取1.2g氢氧化钠于烧杯中,加水1000mL溶解。4.70.02mol/L磷酸：取85%磷酸(优级纯)1.36mL,用水稀释至1000mL。4.8嗯喹酸标准品：纯度大于99%。4.9嗯喹酸标准储备液：准确称取嗯喹酸标准品50.0mg，用0.03mol/L氢氧化钠溶液溶解并稀释至浓度为 1.0 mg/mL,4C保存。有效使用期为一个月。4.10嗯喹酸系列标准使用液:用乙腈将标准储备液稀释至 1.0 μg/mL作为标准工作液。准确量取嗯喹酸标准工作液,配成浓度分别为0.01μg/mL、0.02μg/mL、0.05μg/mL0.1ug/mL、0.2μg/mL的标准使用液，此溶液临用时配制。5仪器和设备5.1 匀浆机。5.2旋转蒸发仪。5.3分析天平,感量0.0001g。5.4天平,感量0.01g。1 SC/T 3028—20065.5离心机:4000r/minc5.6涡旋混合器。5.7液相色谱仪,具荧光检测器。5.8 离心管:50 mL,25 mL。5.9鸡心瓶:50mL。5.10刻度离心管:5mL。6样品制备6.1样品预处理将鱼去鳞，去皮，沿背脊取肌肉；虾去头、去壳，取可食肌肉部分；其他水产样品取可食部分，切为不大于0.5cm×0.5cm×0.5cm的小块,充分勾浆,备用。6.2样品提取称取样品2g(精确到0.01g)于50mL离心管中,加人乙酸乙酯15mL,无水硫酸钠2g，10000r/min～12 000 r/min 匀浆提取 30 s,4 000 r/min离心5min，上清液转人50 mL鸡心瓶中;另取一25mL离心管加人10mL乙酸乙酯，清洗匀浆机刀头，清洗液移人上述50mL离心管中，用玻璃棒捣碎离心管中的沉淀，涡旋混匀1min,4000r/min离心5min，上清液合并至50mL鸡心瓶中。6.3样品净化及浓缩提取液 40℃～50℃下真空浓缩至近干,立即精确加入2.0mL流动相溶解,再加人1mL正已烷，涡旋混匀 1min,转人5mL离心管中,4000 r/min离心10 min,弃去正已烷层(如脂肪较多,可用正已烷重复提取一次）。提取液经0.45μm滤膜过滤后供液相色谱分析。7 测定7.1色谱条件色谱柱:Cl8反相柱,250mm×4.6mm,5 μm,或其他性能相当的色谱柱。流动相:0.02mol/L磷酸：乙：四氢喃=65:20:15,流速为1.0mL/min。检测器波长：激发波长325nm,发射波长369nm。7.2色谱分析7.2.1工作曲线测定分别取标准使用溶液20uL进样，以峰面积为纵坐标，以标准溶液中嗯喹酸含量为横坐标,绘制工作曲线。7.2.2样品测定样品提取液20μL进样，记录峰面积，从工作曲线查得样品提取液中嗯喹酸的含量。8 空白试验除不加试样外,均按上述测定步骤进行。9结果9.1 计算按式(1)计算样品中嗯喹酸残留量。计算结果需扣除空白值X=C