NYT 1650-2008苹果及山楂制品中展青霉素的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 67.080.10B 04NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1650—2008苹果及山楂制品中展青霉素的测定高效液相色谱法Determination of patulin in apple and hawthorn products-High performance liquid chromatography2008-08-10实施2008-07-14 发布中华人民共和国农业部发布 NY/T 1650—2008前言本标准中附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部农垦局提出并归口。本标准起草单位：农业部食品质量监督检验测试中心（上海）。本标准主要起草人：孟瑾、黄菲菲、韩奕奕、韩惠雯、吴榕、何亚斌。I NY/T 1650—2008苹果及山楂制品中展青霉素的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了苹果及山楂制品中展青霉素的高效液相色谱测定方法。本标准适用于苹果及山楂制品中展青霉素的测定。本标准中液体样品检出限为8μg/L、固液体及固体样品检出限为12μg/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试样中的展青霉素经乙睛提取，提取液经净化柱净化后，用高效液相色谱柱分离，以紫外检测器于276nm处检测，外标法定量。4试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T6682规定的一级水。4.1乙(CH:CN)，色谱纯。4.2果胶酶(pectinase,EC 232-885-6)，活性不低于1500IU/g，贮存于2℃～8℃的冰箱中。4.3四氢呋喃溶液：Lp(CHsO)=0.8%)，吸取8mL四氢呋喃(C,HgO)稀释至1000mL水中，充分摇匀。4.4展青霉素标准液：100mg/L，0℃～4℃条件下贮存。4.5展青霉素标准贮备液：准确移取1.00mL展青霉素标准溶液（4.4）于10mL容量瓶中，用乙睛（4.1)稀释定容，充分混匀。该溶液每毫升含展青霉素标准物质10.0μg，有效期6个月。4.6羟甲基糠醛标准物质：质量分数≥99.0%。4.7羟甲基糠醛标准贮备液：准确称取0.02g羟甲基糠醛标准物质（4.6）于50mL烧杯中，用甲醇(CH:OH)溶解并定容至100mL,混匀。该溶液每毫升含羟甲基糠醛标准物质0.2mg。置于0℃～4℃冰箱中保存，有效期6个月。4.8羟甲基糠醛标准工作液：准确吸取1.0mL羟甲基糠醛标准贮备液（4.7），用甲醇稀释定容至10mL，混匀。该溶液每毫升含羟甲基糠醛标准物质20.0ug。置于0℃4℃冰箱中保存，有效期2周。4.9展青霉素混合标准工作液：分别移取1.00mL展青霉素标准工作液（4.5）和1.00mL羟甲基糠醛标准工作液（4.8)于离心管中，氮气吹至近干，用四氢喃溶液（4.3)转移至10mL容量瓶中，定容至刻度，每毫升含展青霉素标准物质1.00μg、羟甲基糠醛标准物质2.00μg，置于0℃～4℃冰箱中保存，有效期2周。1 NY/T1650—20084.10净化柱：Mycrosep228AflaPat柱（内装涂硅藻土、硅胶、硅酸镁载体、无水硫酸钙）*或相当者。4.11滤膜：0.45μm。5仪器和设备常用实验室仪器有以下各项。5.1高效液相色谱仪，配有紫外检测器。5.2分析天平：感量为0.0001g和0.01g。5.3漩涡振荡器。5.4氮吹仪。5.5具塞刻度试管，50mL。6操作步骤6.1试样制备6.1.1液体试样：准确移取4mL试样于50mL具塞刻度试管（5.5)中，待提取。6.1.2固液体、固体试样：固液体样品匀浆、固体试样粉碎后，称取4g（精确至0.01g）于50mL具塞刻度试管（5.5)中，待提取。6.2提取6.2.1液体试样：试样（6.1.1)中加入21mL乙睛（4.1)，于漩涡振荡器（5.3)振荡2min后，静置分层，直接读取上清液体积V1。6.2.2固液体、固体试样：试样（6.1.2)中加入4mL水，加入75μL果胶酶（4.2），40℃下放置2h（或室温下放置16h）。加入21mL乙睛（4.1），于漩涡振荡器（5.3)振荡1min后，静置分层，直接读取上清液体积V1。6.3净化移取约8mL提取液（6.2)于试管中，过Mycrosep228AflaPat净化柱（4.10），收集净化液，准确移取5mL于10mL试管中，40℃条件下用氮气吹至近干，加人0.50mL四氢呋喃溶液（4.3），混匀，过滤膜（4.11），试液供测定。6.4液相色谱分析6.4.1色谱参考条件色谱柱:Cl8,5μ