SN 1059.1-2002进出口食品中沙门氏菌--滤膜筛选法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1059. 1—2002进出口食品中沙门氏菌滤膜筛选法Salmonella in food for import and export-Membrame filter screening method2002-01-16 发布2002-06-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准进出口食品中沙门氏菌滤膜筛选法SN/T. 1059.1--2002*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本880×12301/16印张1/2字数10千字2002年5月第一版2002年5月第一次印刷印数1-2000*书号：155066·2-14384定价6.00元网址 版权专有侵权必究举报电话：（010SN/T 1059.1—2002前言本标准是按照GB/T1.1一1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则＇第1部分：标准编写的基本规定》进行编写的。本标准中沙门氏菌滤膜筛选法中的培养基、培养温度和滤膜法等内容是参考美国公职分析化学家协会（AOAC）《公定分析方法》（1995年第16版17.9.09）样品制备，采用SN0170—1992《出口食品沙门氏菌属（包括亚利柔那菌）检验方法》，并在实验的基础上编写而成。本标准的附录A是标准的附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国天津出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：陈子红、侯丽萍、唐丹舟、张思传、孙俐。本标准首次发布。 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口食品中沙门氏菌SN/T 1059.1—2002滤膜筛选法Salmonella in food for import and export-Membrame filter screening method1 范围本标准规定了进出口食品中沙门氏菌滤膜筛选法。本标准仅适用于进出口方便面、膨化食品、矿泉水、单晶糖、牛奶、饮料、禽肉、椒粒中沙门氏菌筛选。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。SN0170一1992出口食品沙门氏菌属（包括亚利桑那菌）检验方法SN0330-1994出口食品中微生物学检验通则3抽样按SN0330规定执行。4试验方法4.1方法原理将滤膜放入滤器，过滤样品。由于滤膜的作用而使沙门氏菌保留在膜表面上。将滤膜放在EF-18培养基上培养，沙门氏菌形成绿色、蓝绿色、蓝色或黄色菌落。4.2设备和材料4.2.1滤器：一套，备有预滤器。4.2.2＇真空泵。4.2.3滤膜：有机或水相，孔径0.45um。4.2.4培养箱：36℃±1℃，42℃±1℃。4.2.5水浴箱：45℃±1℃，37℃±1℃。4.2.6吸管：1mL、10mL，具刻度。4.2.7玻璃三角瓶和广口瓶：250mL、500mL。4.2.8试管：17mm×170mm，玻璃制。4.2.93玻璃珠：直径5mm。4.2.10平皿：直径90mm。4.2.11天平：感量0.1g。4.2.12均质器。2002-06-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2002-01-16批准1 SN/T1059.1—20024.3培养基和试剂4.3.1蛋白陈-吐温80(PT)稀释液（见附录AA1）。4.3.2四硫磺酸盐肉汤（加碘和煌绿）（见附录AA2）。4.3.3EF-18琼脂（见附录AA3）。4.4样品制备及增菌培养4.4.1如为冷冻产品，应在45℃以下不超过15min，或在2℃～5℃不超过18h解冻。若不能及时检验，应置于一15℃左右保存。非冷冻而易腐的食品，置于4℃冰箱保存。4.4.2以无菌操作，称取25g（mL）样品，置于灭菌均质杯内，加人25mLPT稀释液，以8000～10000r/min均质1min，放入装有200mLPT稀释液的500mL灭菌广口瓶，混合均匀，如pH低于6.6，用灭菌1mol/L氢氧化钠溶液，调pH至6.8士0.2，放人37℃水浴培养4h（以增菌液达到37℃时算起），进行前增菌；其后，移取10mL转种于盛有100mL四硫磺酸盐肉汤（加碘和煌绿）的250mL灭菌广口瓶内，摇匀，42℃士1℃培养20h士2h，进行选择性增菌。4.5过滤和培养将灭菌的过滤装置连接于真空抽滤瓶上，以无菌操作将无菌滤膜放在抽滤底座上，用不锈钢夹子固定。以无菌操作加10mL～20mL无菌蒸馏水于滤器中，用灭菌吸管取选择性增菌液1mL放入滤器中，打开真空泵抽吸液体。再加入10mL～15mL无菌蒸馏水抽取液体，抽