NY_T 2058-2014水稻二化螟抗药性监测技术规程.pdf

ICS 65.020B 15NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2058—2014代替NY/T 2058—2011水稻二化螺抗药性监测技术规程Guideline for insecticide resistance monitoring of the striped stem borer2015-01-01实施2014-10-17 发布中华人民共和国农业部发布 NY/T 2058—2014前言本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草星毛细管点滴法》，与NY/T本标准代替NY/T2058一2011《水稻二化抗药性监测技术规程2058一2011相比.除编辑性修改外主要技术变化如下：修改了标准名称.改为《水稻二化抗药性监测技术规程》；修改了范围，增加了稻苗浸渍法对水稻二化抗药性监测方法；修改了二化抗药性水平的分级标准：修改了附录A水稻二化人工饲料配方和制备，增加了人工饲料配方Ⅱ。本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、南京农业大学、江苏省植物保护站。本标准主要起草人：邵振润、高聪芬、张帅、沈晋良、李永平、吴敏、姚蓉、张绍明。本标准的历次版本发布情况为：-NY/T 2058—2011。I NY/T2058—2014水稻二化螺抗药性监测技术规程1范围本标准规定了毛细管点滴法和稻苗浸渍法监测水稻二化[Chilosuppressulis（Walker)抗药性的方法。本标准适用于水稻二化对杀虫剂的抗药性监测。2试剂与材料2.1生物试材试虫：水稻二化[Chilosuppressulis（Walker）]。供试植物：采用感虫品种，如TN1或汕优系列等。2.2试验药剂原药或母药。2.3试验试剂TritonX-100；丙酮（或二甲基甲酰胺）；所用试剂一般为分析纯。3仪器设备3.1电子天平感量0.1mg）。3.2天平(感1g)。3.3容量瓶(10 ml、25mL)。3.4青霉素瓶（容量为5mlL)。3.5 移液管(1 mlL、2 ml、5 ml)。3.6筒(100mL)。3.7玻璃烧杯（1000ml）。3.8塑料小杯（直径5cm，高4.5cm）。3.9培养皿（小号培养皿：直径5cm；中号培养皿：直径6.5cm）。3. 10滤纸片（直径6.5cm）。3. 11养虫笼（长23cm×宽23cmX高32cm）。3.12养虫缸（直径15cm.高10cm）或玻璃广口瓶（瓶底直径8cm.高10cm）。3.13毛细管点滴器：容积通常为0.04μl.～0.06μL（精确度为0.01μl）。3.14钢精锅（中号：直径24cm.高13cm；大号：直径33cm.高18cm）。3. 15白色塘瓷盘（长30cm、宽20cm、高4.5cm）。3. 16高压灭菌锅（最大安全压力：102kPa；最高温度：121℃）。3. 17恒温培养箱（容量320I..温度范围0℃～50℃.光照度120001x）、恒温养虫室或人工气候箱，3. 18电磁炉。3. 19镊子、剪刀、小号毛笔，4试验步骤4.1试材准备1 NY/T2058—20144.1.1试虫采集选当地具有代表性的稻田3块～5块，每块田随机5点采集，每地采集二化卵块200块以上，或采集幼虫、蛹500头以上，成虫200头以上（成虫的采集可在白天使用捕虫网、养虫笼等工具捕捉或夜晚灯光诱集）.供室内饲养。4.1.2试虫饲养成虫产卵采集的成虫放人恒温培养箱中[温度（26土1)℃、光周期16h：8h(L：D)的养虫笼中，相对湿度为85%～90%，在未用药处理的感虫、生长嫩绿的秧苗上分批产卵（2d～3d一批），所产卵块分批在恒温培养箱［温度（28士1)℃、光周期16h：8h(L：D)］中培育至黑头。幼虫饲养将大田采集或室内饲养已黑头的卵块接入盛有人工饲料或裁有5cm～6cm高稻苗的养虫缸或玻璃广口瓶中（每缸/瓶幼虫密度控制在约100头），置于温度为（28士1)℃、光周期为16h：8h(1：D)的恒温培养箱、恒温养虫室或人工气候箱中，设弱下光照，以免幼虫逃逸。饲养至生理状态一致、体重范用在每头0.45mg～0.65mg的2龄中期幼虫为标准试虫，供稻苗浸渍法试验；体重范围在每头6mg～9mg的4龄中期幼虫为标准试虫，供毛细管点滴法试验。4.1.3供试水稻供取食水稻：取一定量水稻种子，于70℃温水中表面消毒10min，在适宜温度下（一般28℃）浸种2d，催芽至露白后，播入玻璃广口瓶或养虫缸中，瓶/缸口封上一层保鲜膜并扎少量透气孔，置于适宜温度下培养，待稻苗长至5cm～6cm时供初孵幼虫取食。供稻苗浸渍法试验水稻：同上述方法催芽后，在温室内用直径5cm，高4.5cm的塑料小杯播种水稻，每杯25株～35株稻苗，选择生长3周（约25cm高）的稻苗供试。4.1.4试验人工饲料按附录A配制人工饲料，现配现用，或于4℃冰