WW_T 0036-2012田野考古出土人类遗骸DNA获取技术规范.pdf

A16备案号：37260-2012WW中华人民共和国文物保护行业标准WW/T 0036 — 2012田野考古出土人类遗骸DNA获取技术规范Technical specification for DNA extraction from archaeological human remains2012-07-31发布2012-08-01实施中华人民共和国国家文物局发布 中华人民共和国文物保护行业标准田野考古出土人类遗骸DNA获取技术规范Technical specification for DNA extraction from archaeological human remainsWW/T 0036—2012*中华人民共和国国家文物局主编文物出版社出版发行（北京市东城区东直门内北小街2号楼）E-mail:web@北京达利天成印刷公司印刷新华书店经销￥开本：880毫米×1230毫米1/16印张：12012年12月第1版　2012年12月第1次印刷统一书号：115010-1802：定价：10.00元 WW/T 0036—2012目次前言IⅢI范围11术语和定义213样本采集、运输和保存3.1样本采集13.2样本运输 23.3样本保存24　样本评估　25５ DNA提取 3基本要求 35.15.2古DNA实验室基本设置35.3样本处理35.4DNA提取原理45.5硅粒法45.6 硅离心柱法a 55.7 硅离心柱法b 65.8DNA提取液质量鉴定7真实性验证866.1实验室内部真实性验证 86.2克隆测序86.3其他实验室重复验证8附录A（规范性附录）样本采集记录格式9附录B（规范性附录）样本保存现状记录格式10附录C（资料性附录）样本检测记录格式11参考文献121 WW/T 0036—2012 II WW/T 0036—2012前言本标准依据GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国国家文物局提出，本标准由全国文物保护标准化技术委员会（SAC/TC289）归口。本标准负责起草单位：吉林大学。本标准主要起草人：周慧、朱泓、蔡大伟、张全超、崔银秋、许月。II WW/T 0036—2012Iv WW/T 0036—2012田野考古出土人类遗骸DNA获取技术规范1 范围本标准规定了田野考古出土人类遗骸DNA获取的基本操作技术及要求。本标准适用于田野考古出土人类遗骸DNA的获取。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1脱氧核糖核酸 DNAA deoxyribonucleic acid由脱氧核糖核苷酸构成的高分子聚合物。互补的双链呈双螺旋形，它是绝大多数生物的遗传物质。2.2聚合酶链反应 PCRpolymerase chain reaction一种体外扩增DNA的方法，可在混合的DNA中特异地扩增靶序列。2.3外源DNA exogenous DNA样本之外的DNA，例如考古发掘者、样本采集者、样本研究者以及DNA提取相关实验人员的DNA.3样本采集、运输和保存3.1样本采集3.1.1采集工具骨骼样本采集工具：毛刷、小型电锯、小型电钻等。牙齿样本采集工具：毛刷、拔牙钳、牙钻等。软组织样本采集工具：手术刀、医用剪刀、镊子等。3.1.2基本要求在考古发掘过程中，对需要进行采集的样本，应减少人员直接接触，并避免阳光直射或雨淋，尤其是不能用水清洗。对于特别潮湿的样本，应先置于阴凉处晾干。采集者应戴一次性无菌的头套、口罩、手套，使用无菌采集工具。为了避免样本间的交叉污染，每采集完一个样本后，均需更换新的无菌采集工具。对于不便更换的采集工具应用5%次氯酸溶液清洗干净后再使用。对于接触样本的人员，宜用口腔拭子采集口腔黏膜细胞，或拔取数根带有毛囊的头发，以备后续的真实性验证。3.1.3采集方法骨骼宜选择表面完整无破损且光滑致密的样本，放入一次性塑封袋中，并贴上样本标签（见图1）。对于特别珍贵的样本，可在骨骼局部位置用小型电锯切下一小块骨片（约2g），或用小型电钻钻取适量骨粉（约2g）。切割骨片或者钻取骨粉前，应先用毛刷清理骨骼表面的泥土或其他沉积物，并1 WW/T 0036—2012用5%次氯酸溶液擦拭骨骼表面，以除去骨骼表面的外源DNA污染样本标签出土遗址：出土编号：采集时间：年月日采集者：备注：图1样本标签牙齿用拔牙钳将牙齿从上颌骨或下颌骨中拔出，放入一次性塑封袋中，并贴上样本标签。对于特别珍贵的样本，可用牙钻在牙根部分钻取适量牙粉。钻取牙粉前，应先将牙齿置于5%次氯酸中浸泡15min，以除去牙齿表面的外源DNA污染。软组织采集毛发样本时，如果有毛囊应连同毛囊一起拔取数根，放入一次性塑封袋中，并贴上样本标签。采集肌肉、皮肤以及脑和内脏等器官样本时，应用手术刀切取或医用剪子剪取部分样本，用镊子夹取放入一次性塑封袋中，并贴上样本标签。3.