SN_T 3137-2012出口食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其代谢物的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3137—2012出口食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其代谢物的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of deoxynivalenol , 3-acetyl-deoxynivalenol 15-O-acetyl-4-deoxynivalenol and their metabolite in food for export-LC-MS/MS method2012-05-07 发布2012-11-16 实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3137—2012前言本标准按照 GB/T 1.1一2009 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国陕西出入境检验检疫局、中华人民共和国深圳出人境检验检疫局。本标准主要起草人：邹阳、李建华、欧阳姗岳振峰、乐爱山、孔祥虹、何强、张莹、张璐。I SN/T 3137---2012出口食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其代谢物的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了出口食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其代谢产物去环氧脱氧雪腐镰刀菌烯醇残留量的液相色谱-质谱/质谱检测方法。本标准适用于小麦、大米、玉米、啤酒、饼干中脱氧雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇及鸡肉、猪肝、猪肾、牛奶鸡蛋中代谢产物去环氧脱氧雪腐镰刀菌烯醇残留量的测定和确证。2方法提要试样中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其代谢产物去环氧脱氧雪腐镰刀菌烯醇用去腈提取，经正邑烷脱脂和固相萃取柱净化后，采用液相色谱-质谱/质谱检测，外标法定量。3试剂和材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为超纯水。3.1乙腈:HPLC级。3.2甲醇:HPLC级。3.3正已烷：农残级。3.4氯化钠。3.5无水硫酸钠：经650℃灼烧4h，置于干燥器中备用。3.6乙腈饱和正已烷溶液：量取200mL正已烷-于250mL分液漏斗中，加人少量乙腈，剧烈振摇数分钟,静止分层,弃去下层乙腈层即得。3.7甲醇-水溶液:量取 20 mL甲醇,加人 80 mL水,混合均匀。3.8标准品：脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol,DON），纯度大于或等于96.0%；3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇（3-acetyldeoxynivalenol,3-Ac-DON），纯度大于或等于94.0%，15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇（15-O-acetyl-4-deoxynivalenol,15-Ac-DON)，纯度大于或等于 94.0%。标准品信息参见表 A.l。3.9去环氧脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deepoxy-deoxynivalenol,DOM-1)乙腈溶液：浓度为50 μg/mL。3.10标准储备溶液：分别准确称取一定量的 DON、3-Ac-DON和 15-Ac-DON标准品（3.8）用乙溶解，配成0.5mg/mL的标准储备液，于一18℃以下避光保存。3.11标准中间溶液：准确移取各标准储备溶液（3.9,3.10)1mL于10 mL棕色容量瓶中，用乙腈定容至刻度，于一18℃以下避光保存。3.12标准工作溶液：根据使用需要，准确吸取一定量的标准中间溶液（3.11），用乙睛分别配制合适浓1 SN/T 3137—2012度的标准工作溶液。浓度分别为:DON 1.0 μg/mL,3-Ac-DON 5.0 μg/mL,15-Ac-DON 5.0 μg/mL,DOM-1 0.1 μg/mL,于一18 ℃以下避光保存。3.13基质标准工作溶液：移取不同体积的标准工作溶液（3.12），用空白样品提取液配成不同浓度的基质标准工作溶液。现用现配。3.14OasisHLB固相萃取柱或相当者:60 mg,3 mL。4仪器和设备4.1液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。4.2电子天平：感量0.1mg和0.01g。4.3粉碎机。4.4组织捣碎机。4.5均质器。4.6涡旋混匀器。4.7 振荡器。4.8固相萃取装置。4.9高速离心机：10000 r/min。4.10离心管:15 mL和50 mL。55试样制备与保存5.1试样制备5.1.1小麦、大米、玉米及饼干取有代表性样品500g，用粉碎机粉碎并通过2.0mm圆孔筛，混匀，装人洁净容器内，密闭并标明标记。5. 1.2 鸡肉、鸡蛋及动物内脏取有代表性样品500g，取可食部分经捣碎机充分捣碎均匀，装人洁净容器内作为试样。密闭，标明标记。5.2试样保存小麦、大米、玉米、饼干及啤酒等试样于