SN_T 2655-2010进出口果汁中纳他霉素残留量检测方法 高效液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2655—2010进出口果汁中纳他霉素残留量检测方法高效液相色谱法Determination of natamycin residue in fruit juice for import and export-HPLC2011-05-01实施2010-11-01发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准进出口果汁中纳他霉素残留量检测方法高效液相色谱法SN/T2655—2010*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本880×12301/16印张11字数20千字2011年4月第一版2011年4月第一次印刷印数1—1600*书号：155066·2-21836定价18.00元 SN/T 2655—2010言前本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国河南出入境检验检疫局。本标准主要起草人：刘亚风、袁萍、杨冀州、梁炜。 SN/T2655—2010进出口果汁中纳他霉素残留量检测方法高效液相色谱法1范围本标准规定了进出口果汁中纳他霉素的高效液相色谱检测方法。本标准适用于进出口苹果汁、橙汁、梨汁中纳他霉素残留量的检测。2试样制备与保存2.1试样的制备取适量果汁样品，混合均匀后取样。2.2试样的保存储存样品的容器应密封完好，置0℃～4℃冷藏备用。在样品的保存和制样过程中，应防止样品受到污染或发生纳他霉素含量的变化。3方法提要样品用水按一定比例稀释后，经过离心、固相萃取净化，用配有二极管阵列检测器（DAD)的高效液相色谱仪检测，外标法定量。4试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为超纯水。4.1甲醇：色谱纯。4.2纳他霉素标准品（CAS编号7681-93-8）：纯度≥99%。4.3纳他霉素标准溶液：准确称取适量的纳他霉素标准品，用甲醇配制成1000μg/mL的标准储备液。根据需要用流动相稀释成适当浓度的标准工作溶液。5仪器和设备5.1高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器(DAD)。5.2离心机：最大转速5000r/min5.30.22μm滤膜。5.4C18固相萃取柱：3mL。6测定步骤6.1样品处理准确称取5g试样（精确到0.01g)于50mL棕色容量瓶中，用5%的甲醇水溶液定容至刻度，混匀，1 SN/T2655—2010移入50mL离心管中，于4000r/min离心10min，待净化。移取10mL上清液于C18固相萃取柱中，以3mL/min的流速通过已活化的小柱，用10mL水洗柱，弃去流出液，然后用1mL甲醇洗脱纳他霉素，收集洗脱液于5mL试管中，氮吹浓缩至干，用0.5mL流动相溶解残渣，经0.22μm滤膜过滤，供液相色谱测定。6.2色谱条件色谱条件如下：a)流动相：甲醇一水（60十40，体积比）；b)流速：0.25mL/min；c)检测波长：305nm；d)色谱柱：ZorbaxSB-C18柱，150mm×2.1mm（内径）或相当者e)柱温：室温；f)进样量：5μL。6.3色谱测定根据样液中纳他霉素含量的情况，选定与待测试样浓度相近的混合标准工作溶液，混合标准工作溶液和样液中纳他霉素的响应值均应在仪器测定的线性范围内。对混合标准工作溶液和样液等体积参插进行测定。以标准溶液峰的保留时间和该标准溶液峰在二极管阵列检测器（DAD)上呈现的紫外光谱特征（参见附录A）为依据进行定性。在6.2色谱条件下，纳他霉素的保留时间约为6.2min，标准品的色谱图参见附录B。6.4空白试验除不称取试样外，均按上述分析步骤同时完成空白试验。7结果计算和表达用数据处理软件中的外标法，或绘制标准曲线，按照式（1）计算样品中纳他霉素残留量。AXcsXV(1)xm式中：X一试样中纳他霉素的残留量，单位为微克每克（ug/gA样液中纳他霉素的色谱峰面积：-标准工作液中纳他霉素的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；CSV.-样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；As-标准工作液中纳他霉素的色谱峰面积：m最终样液所代表的试样量，单位为克（g）。注：计算结果需扣除空白值。8测定低限和回收率8.1测定低限本方法测定低限为0.05mg/kg。2 SN/T2655-20108.2回收率苹果汁添加水平和回收率见表1。表1添加水平和回收率添加水平回收率名称%mg/kg0. 0574.0~86.0苹果汁0. 590.0~10092.8~96.00.0574.0~88.0橙汁90.0~1000.510.094.7~97.072.0~88.0J梨汁0.590.0~98.010.094.4~97.6S SN