SN_T 2677-2010进出口动物源性食品中雄性激素类药物残留量的检测方法 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2677—2010进出口动物源性食品中雄性激素类药物残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法Determination of androgen residues in foodstuffs ofanimal origin for import and export-LC-MS/MS method2010-11-01 发布2011-05-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2677—2010前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、中国检科院。本标准主要起草人：林黎明、张鸿伟、陈亮珍、杜明、孟庆贺、岳振锋、彭涛、庞士平、包大勇。 SN/T 2677—2010进出口动物源性食品中雄性激素类药物残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法•范围1本标准规定了动物源食品中7种雄性激素类药物残留量测定的制样、液相色谱-质谱/质谱测定和确证方法。本标准适用于蜂蜜、牛奶、猪肾、猪肝和猪肉中去甲雄三烯醇酮、去氢睾酮、19-去甲睾酮、睾酮、脱氢表雄酮、雄烯二酮和表睾酮等七种雄性激素类药物残留量的测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要试样经酶解，乙腈提取样品中化种雄性激素类药物残留，固相萃取柱净化，浓缩，液相色谱-质谱/质谱测定，内标法定量。4.试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯；水为GB/T/6682规定的一级水4.1乙腈,色谱级。4.2正已烷，色谱级。4.3丙酮,色谱级。4.4甲醇,色谱级。4.51正丙醇,色谱级。4.6β葡糖苷硫酸酯酶（葡萄糖苷酶：117800unit/mL;硫酸酯酶：1008unit/mL)。4.7 硅藻土。4.8丙酮-水溶液（20+80体积比）：取丙酮（4.3)20mL，水80mL，混合后振摇混匀。4.9乙腈饱和的正已烷溶液：取正已烷（4.2)200mL于250mL分液漏斗中，加人少量乙睛（4.1），剧烈振摇数分钟，静止分层后弃下层乙腈层即得。4.10乙腈-水溶液（10十90,体积比）：取乙腈(4.1)10 mL，水 90 mL，混合后振荡混匀。4.11固相萃取柱:Cis柱,500mg,6mL或相当者，使用前用5mL甲醇,5mL水活化。4.12固相萃取柱:NH²柱,500mg,6 mL或相当者,使用前用5mL 乙腈活化4.13标准物质和内标：去甲雄三烯醇酮、去氢睾酮、19-去甲睾酮、睾酮、脱氢表雄酮、雄烯二酮、表睾酮1 SN/T 2677—2010等标准物质,纯度≥98%;睾酮-D2和脱氢表雄酮-D²内标物质:纯度≥97%。4.14标准溶液：4.14.1标准储备溶液：分别准确称取适量七种雄性激素相应化合物标准物质（4.13），用甲醇溶解定容至 50 mL,得质量浓度分别为1000μg/mL的标准储备溶液。在一18℃以下,有效期12个月。4.14.2混合标准中间液：准确吸取各种雄性激素类标准储备液（4.14.1)适量，用甲醇准确稀释到去甲雄三烯醇酮、去氢睾酮、19-去甲睾酮、睾酮、雄烯二酮、表睾酮的浓度为10 μg/mL,脱氢表雄酮的浓度为50 μg/mL,在一18℃以下,有效期 9个月。4.14.3氛代内标储备溶液：分别准确称取适量睾酮-D²和脱氢表雄酮-D2标准物质（4.13），用甲醇溶解定容至 50 mL，得质量浓度分别为1000 ug/mL的氛代内标储备溶液，在一18℃以下，有效期12个月。4.14.4混合氛代内标中间溶液：准确吸取2种氛代内标储备液（4.14.3)适量，用甲醇准确稀释到睾酮-D²的浓度为 10 μg/mL，脱氢表雄酮-D²的浓度为 50 μg/mL,在18℃以下,有效期 9个月。4.14.5混合标准工作液：标准工作液根据需要使用前用空白样品基质提取溶液配制，空白样品基质溶液采用相应的无残留基质样品参照7.1.1、7.1.2、7.2所述操作步骤操作。该溶液使用前配制。4.14.6混合氛代内标工作溶液：分别准确吸取混合氛代内标中间液（4.14.4)适量，用甲醇准确稀释到睾酮-D²的浓度为20 μg/L,脱氢表雄酮-D²的浓度为 500 μg/L作为氛代内标工作溶液。该溶液使用前配制。4.15微孔滤膜:0.22um。5仪器和设备5.1液相色谱-质谱/质谱仪或相当者：配有电喷雾离子源。5.2·固相萃取装置。5.3旋涡混合器。5.4高速冷冻离心机：10000r/min。5.5螺旋盖聚丙烯离心试管,50