NY_T 1964.3-2010农药登记用卫生杀虫剂室内试验试虫养殖方法 第3部分：白纹伊蚊.pdf

ICS 65.100B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1964.3-2010农药登记用卫生杀虫剂室内试验试虫养殖方法第3部分：白纹伊蚊Rearing methods of vector insects for laboratory test of public healthinsecticides registration-Part 3: Aedes albopictus2010-12-23 发布2011-02-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 1964. 3—2010前言《农药登记用卫生杀虫剂室内试验试虫养殖方法》为系列标准。第1部分：家蝇第2部分：淡色库蚊和致倦库蚊第3部分：白纹伊蚊第4部分：德国小本部分是《农药登记用卫生杀虫剂室内试验试虫养殖方法》的第3部分。本部分遵照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。本部分起草单位：农业部农药检定所、中国科学院动物研究所、军事医学科学院微生物流行病研究所、济南市疾病预防控制中心、北京市疾病预防控制中心。本部分主要起草人：朱春雨、李梅、张洪杰、辛正、张文君、曾晓、吴新平。T NY/T 1964. 3--2010农药登记用卫生杀虫剂室内试验试虫养殖方法第3部分：白纹伊蚊1 范围本部分规定了农药登记用卫生杀虫剂室内药效试验用白纹伊蚊的养殖方法和控制指标。本部分适用于农药登记用卫生杀虫剂室内药效试验用白纹伊蚊的养殖。2 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2. 1世代 generation指卵从离开母体到发育为成虫，且能产生子代为止的个体发育史。2. 2繁殖盛期 thriving propagation season指雌性成蚊繁殖能力最旺盛的时期。2. 3卵纸 egg board指黏附有白纹伊蚊卵粒的接卵纸(如滤纸等)。2. 4孵熟hatch mature指未发育成熟蚊卵卵胚，发育成为入水即能孵化出幼虫的成熟卵胚的过程。3仪器和材料3.1饲养笼：在框架上缚以蚊帐纱布制成的方形纱布笼。饲养笼不小于20 cm×20cm×20 cm;网孔目数应≥16 目；笼的一面正中开一个直径 15cm～18 cm 的圆孔，连接与开孔直径相同，长30 cm～50 cm的布袖或直接在笼的一面接长 30 cm～50cm 的布袖。3.2塘瓷盆、盘或其他盛水容器。3.3干燥器。3.4#捞网:60目。3.5 吸管。3.6纱布条。3.7 海绵。3.8 滤纸。3.9 培养皿。3.10葡萄糖。3.11酵母粉。1 NY/T 1964. 3-—20103.12肝粉：将鸡肝或猪肝煮熟并剥离掉大、中血管，放入 60℃～80℃烤箱中烘干后粉碎，过80目筛，制成鸡肝或猪肝粉。3.13小鼠大鼠配合饲料。3.14小鼠吸血固定夹(图1)或人工膜吸血装置6—-弹性拦网;一上夹片；边框；7一铰接销轴；一弹簧；8-.弹性拦网;一一下夹片；9——锁紧金属片。4-一边框;5-注：使用方法是将小鼠置于上下夹片的弹性拦网之间利用锁紧金属片锁定上下边框，将小鼠夹持。图1小鼠吸血固定夹4饲养条件温度：(26±2)℃；湿度：（75±10)%;光照:14：10(L: D)。5操作步骤5.1　成虫5. 1. 1试验用成虫取蚊蛹700只～800只，置于盛水容器内，所占水面积应不超过水面总面积的80%。将盛蛹容器放人饲养笼中,将第 1d羽化成虫弃之不用,第2d将盛蛹容器移人另一饲养笼中羽化24 h,取出盛蛹容器,标注羽化时间。开始羽化成虫时，饲养笼内应放人培养Ⅲ，内盛用5%～10%葡萄糖溶液浸透的海绵，并每天更换。　试验结束,应采用非药物方法处死剩余超龄期成虫。世代饲养结束，应清洗饲养笼、饲养用培养皿、海绵等。5.1.2传代用成虫2 NY/T 1964. 3—20羽化与饲养.1取蚊蛹500只～600只，置于盛水容器内，蛹所占水面积不超过水面总面积的80%。.2将盛蛹容器放入饲养笼中，待其全部羽化后取出容器。.3按进行饲养。.4成虫羽化第3d～6d,饲养笼中放人用固定夹固定的小鼠或人工膜吸血装置，供雌蚊吸血6 h～12 h。卵收集与保存.1成蚊吸血后第3d,饲养笼内放人收卵杯(瓷或其他材质的杯或碗）。杯内加人清水，内壁贴有注明收卵日期的6cm～8 cm 宽的白色滤纸条,水量保持 30%的卵纸浸人水中,1d后取出产有卵粒的滤纸，再行放入新接卵杯和滤纸收卵，可连续收卵2次。.2将卵纸内折，放人下层盛有过饱和硝酸钾溶液的干燥器上层，或其他容器孵熟 48 h后，卵即可下水孵化繁衍。.3常温下,.2干燥器中贮存卵纸，蚊卵保存期宜小于60d。5.2幼虫5.2.1直径32cm塘瓷盆,加入3L脱氯清水，放人粘有卵600粒～700粒的卵纸，孵化幼虫500条～600条。5.2.2幼虫孵化后，用吸管吸取5%酵母一肝粉混悬溶液（肝