肽与蛋白质HPLC分析和纯化手册.docx

第一章 简介：肽和蛋白质的反相 HPLC 分析与纯化 反相高效液相色谱〔RP-HPLC〕已经成为一种分析和纯化生物分子广泛而牢靠的方法。RP-HPLC 在肽、蛋白质分析和纯化方面的重要作用在于它的分别度：RP-HPLC 能够分别具有几乎同样序列的多肽，这不仅包括那些胰岛素消化物中的小肽，还包括更大的肽。仅相差一个氨基酸残基的多肽通常可以用RP-HPLC 分别，如图 1 所示的胰岛素变异物的分别。胰岛素变异物的分子量都在 5300 左右,只是在氨基酸序列上有略微的不同，即使这样，大局部的变异物都可以用RP-HPLC 分别。特别的是，反相色谱能分别人和兔的胰岛素，两者仅在于一个亚甲基的不同——兔胰