高效液相色谱仪的使用、HPLC原理.docVIP

高效液相色谱仪的使用、HPLC原理 2010年天然药物提取与分离 期末考查试卷 1、简述高效液相色谱仪的各组成部件及使用注意事项。 答:?、组成: 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。高效液相色谱仪的结构图如下: (1) 高压输液泵 a.主要部件之一～压力:150，350×105 Pa。 b.为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相,10μm,～ 液体的流动相高 速通过时～将产生很高的压力～因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。 c.应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性 1 (2) 梯度淋洗装臵 外梯度:利用两台高压输液泵～将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室～混合后进入色谱柱。 内梯度:一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。 (3) 进样装臵 a.阀进样:手动进样～六通阀 b.泵进样:自