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- 2023-08-22 发布于上海
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人HBVHBx定向敲入P53位点大鼠胚胎干细胞株的建立的中期报告
根据我们的研究计划,我们目前正在进行人乙型肝炎病毒(HBV)HBx基因定向敲入P53位点的大鼠胚胎干细胞株的建立工作。在中期报告中,我们首先回顾了已经完成的工作和现有的进展。
在实验室中,我们成功利用CRISPR/Cas9技术来敲入人HBx基因到大鼠胚胎干细胞中。我们通过PCR和Western blot检测技术验证了定向敲入HBx基因的细胞株。在继续的实验中,我们利用同样的技术来敲入P53基因位点。
在敲入P53基因位点后,我们使用细胞存活率测试和细胞周期分析来评估敲入细胞系的稳定性和纯度。我们确定了最优化的条件来生成纯型的敲合细胞系,并进行了长时间的细胞培养和定期检测。
在接下来的工作中,我们将进一步分析HBx基因敲入P53位点是否诱导了P53失活和细胞增殖增加等肿瘤形成相关的现象。我们还将进行染色体组学和凋亡分析,以进一步了解细胞中HBV HBx和P53基因的相互作用及其对细胞命运的影响。
总之,我们的工作旨在建立定向敲入HBx和P53基因位点的大鼠胚胎干细胞株,并探讨其在肿瘤形成中的作用。我们的中期报告展示了工作的进展情况,我们将继续深入探索这一领域的知识和应用。
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