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粪便检验丨隐血试验-完整版PPT课件.pptx

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临床检验基础技术 粪便检验-隐血试验(OBT)职业教育医学检验技术专业教学资源库 隐血:上消化道出血量小于5ml,粪便中无可见的血液,且因红细胞被破坏,显微镜检查也观察不到红细胞,这种肉眼及显微镜均不能证明的出血称为隐血。隐血试验:通过化学法或免疫法等方法来证实隐血是否存在。检测方法:化学法-邻联甲苯胺法 干化学试带法 单克隆胶体金试带法 概述 01化学法-邻联甲苯胺法 血红蛋白含有类似过氧化物酶的作用,催化供氢体,将供氢体中的氢转移给过氧化氢生成水,供氢体脱氢(氧化)后形成发色基团而呈色。呈色的深浅可反映血红蛋白量(出血量)的多少。检测原理检测方法用竹签挑取少许粪便于滤纸片上,滴加邻联甲苯胺冰乙酸液2~3滴,再加H2O2(1mol/L)2 ~ 3滴,于标本上立即观察结果,报告。 01化学法-邻联甲苯胺法 根据出现颜色的时间及颜色的深浅来判读结果: (---)2分钟后仍不显色 (+)10秒后由浅蓝渐变深蓝 (++)初显浅蓝褐色渐变成明显蓝褐色 (+++)立即呈现蓝褐色 (++++)立即呈现黑蓝色结果示意图 01化学法-邻联甲苯胺法 除邻联甲苯胺法外还有以下化学方法:邻甲苯胺法、还原酚酞法、联苯胺法、愈创木酯法、匹拉米洞法、无色孔雀绿法等 。 01化学法-邻联甲苯胺法影响因素此操作简便易行,但缺乏特异性和准确性,常见的影响因素有1、动物性食品因含有血红蛋白和肌红蛋白或其他酶,可使隐血试验出现假阳性。2、大量生食蔬菜中含有植物光氧化物酶也可使结果出现假阳性。3、如服用大量维生素C或其他具有还原作用的药物,则可使过氧化物酶被还原,不能再氧化色原物,故可出现假阴性。4、血液在肠道中停留过久,血红蛋白被细菌降解也会导致假阴性等。 01化学法-邻联甲苯胺法质量保证试验前3天必须禁食动物血、肉、肝,是为了避免假阳性。禁服铁剂、维生素C是为了避免假阴性。1H2O2最好新鲜配制。所用的器具要清洁。每天做阳性对照和阴性对照。234 02免疫法主要方法:酶联免疫吸附法胶体金法免疫斑点法胶乳凝聚法反向间接血凝法等用胶体金(有颜色)等标记物标记抗人血红蛋白抗体,与粪便中的血红蛋白(红细胞内容物)结合,在指定位置出现颜色变化,根据颜色的有无及深浅判断阴性、弱阳性、阳性、强阳性。 02免疫法胶体金法结果判读: 02免疫法影响因素此操作具有快速、方便、特异、灵敏和特异性高等优点假阳性:因灵敏度而引起:1.胃肠道生理性失血(2ml/24h);2.服用刺激胃肠道的药物引起的消化道出血(2~5ml/24h)。假阴性:消化道出血后,血红蛋白在胃肠道中被消化酶级细菌作用后分解而使免疫原性减弱、消失或改变。主要用于下消化道出血检验,而40~50%上消化道出血不能检出;大量出血时,血红蛋白(抗原)浓度过高造成的与单克隆抗体不匹配(即后带效应),亦可出现假阴性。 02免疫法质量保证试验前3天必须禁食动物血、肉、肝,是为了避免假阳性。禁服铁剂、维生素C是为了避免假阴性。1每天做阳性对照和阴性对照。2 03参考值:阴性。临床意义:粪便隐血试验阳性对消化道出血的诊断有重要的价 值。如消化性溃疡、药物(如阿司匹林、糖皮质激素、 吲哚美辛等)对胃黏膜的损伤、肠结核、克罗恩病、 溃疡性结肠炎、钩虫病、结肠息肉以及消化道肿瘤, 粪便隐血试验常为阳性。参考值及临床意义 03隐血试验可作为消化道肿瘤普查的一个筛选指标,其连续检测对早期发现结肠癌,胃癌等恶性消化道肿瘤具有重要价值。例胃癌:早期符合率为20% 晚期符合率可高达95%参考值及临床意义 谢谢,再见!永州职业技术学院基础医学部

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