RP-HPLC测定大鼠体内D、L-神经兴奋型氨基酸的含量的中期报告.docxVIP

RP-HPLC测定大鼠体内D、L-神经兴奋型氨基酸的含量的中期报告 RP-HPLC（Reverse Phase-High Performance Liquid Chromatography）是一种高效液相色谱方法，可以用于分离和定量分析复杂混合物中的化合物。在本次实验中，我们使用RP-HPLC方法，测定大鼠体内D、L-神经兴奋型氨基酸的含量。 实验过程如下： 1.收集样品：我们选用健康的大鼠，将其处死，将大脑取出，将其操作台上称重，并将其均匀地分成几分，分别保存在离心管中。 2.制备样品：将大脑组织样品加入对应提取剂，用高速均质机充分混合，然后离心收集上清液。 3.样品前处理：将上清液滤过0.22微米过滤器，以去除杂质，然后加入内标作为定量标准。 4.色谱条件：我们使用Waters 2695系统进行分离，使用YMC Triart C18柱，在流动相为0.1% TFA aqueous solution和0.1% TFA acetonitrile下进行分离。梯度洗脱方式为10% A、10% B，最终为10分A、90分B。 5.检测：使用UV检测器进行检测，采用254nm波长进行检测。 6.数据处理：将检测到的峰面积数据用专用软件计算出对应氨基酸的浓度，最终得出大鼠体内D、L-神经兴奋型氨基酸的含量。 当前实验已进行到样品前处理阶段，下一步将进入色谱条件调试和检测阶段。