高中生物：基因工程.pptVIP

第一页，共三十八页，2022年，8月28日 基础理论  和技术的发展 催生了基因工程 阅读课本第2页 第二页，共三十八页，2022年，8月28日 1.1 DNA重组技术的基本工具 是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切” 和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的新的生物类型和生物产品 分析概念： 工 具 为什么 要加工 什么是 表达 用什么 导入 第三页，共三十八页，2022年，8月28日 基因操作的工具 基因的剪刀（分子手术刀） ——限制性核酸内切酶（限制酶） 基因的针线（分子缝合针） ——DNA连接酶 ?基因的运输工具（分子运输车） ——运载体??? 到哪里去寻找这种酶 第四页，共三十八页，2022年，8月28日 （1）限制酶???  ①分布：主要在原核生物中。 ②作用特点:专一性，识别特定核苷酸序列，切割特定切点。 ?? ③结果：产生黏性未端和平末端 ??? ④举例：EcoR1限制酶、Sma1限制酶??? 与我们学过的 DNA酶相同吗？ 识别序列的特点 作用是什么 两者的区别 这两种酶切的特点 切断的是什么键 第五页，共三十八页，2022年，8月28日 限制酶的识别特点 以中轴线双侧的DNA上碱基呈反向对称，重复排列 如：GAA TTC CCC GGG CTT AAG GGG CCC 第六页，共三十八页，2022年，8月28日 （2）DNA连接酶???  ①连接的部位：磷酸和脱氧核糖之间的键： 磷酸二酯键（梯子的扶手） ②结果：两个相同的未端的连接。 ③举例：E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 ?? 与DNA聚合酶 相同吗 二者在性质 上的区别 第七页，共三十八页，2022年，8月28日 （3）运载体???  ①作用：将外源基因送入受体细胞。 ②具备的条件： 能在宿主细胞内复制 并稳定地保存。???????????????具有多个限制酶切点。???????????????具有某些标记基因 对受体细胞无害 ③举例：质粒、噬菌体 和动植物病毒。??? 为什么 要具备 这些条件 第八页，共三十八页，2022年，8月28日 1.2基因工程的 基本操作程序 为什么要获得目的基因 为什么要把目的基因 与载体结合 受体细胞是指什么 为什么要进行检测 第九页，共三十八页，2022年，8月28日 第一步：获取目的基因方法： 1.从基因文库中获取目的基因。 第十页，共三十八页，2022年，8月28日 基因文库的构建模式图 通过对 受体菌的 培养而 储存基因 第十一页，共三十八页，2022年，8月28日 第一步：获取目的基因方法： 1.从基因文库中获取目的基因。 2.利用PCR技术合成DNA PCR:聚合酶链式反应.是以DNA变性、复制的 某些特性为原理设计的. 前提条件是必须对目的基因有一定的了解， 需要设计引物。 第十二页，共三十八页，2022年，8月28日 PCR原理图 第十三页，共三十八页，2022年，8月28日 PCR的过程 （1）以DNA 片段作模板，在 90℃ 高温下，分开成 为 单链DNA。 （2）以DNA 小段寡聚核苷酸做引物，在 50℃ 的温度下，找到可以配对的正链和负链，形成互补结合 （3）在 70℃ 高温下，合成一条与模板 DNA 单链（正链或负链）互补结合的DNA新链。 （4）以上三个步骤周而复始，即反应体系的温度从 90oC- 50oC- 75oC，目的基因的量不断增加 反应体系中经历：变性——淬火——合成——重复 。 结果：目的基因的量成指数形式扩增（2n) 高温的作用是？ 引物是怎样获得的？ 四种脱氧核苷三磷酸（4 X dNTP) 酶 高温 DNA 聚合酶 （Taq 酶）， 原料 第十四页，共三十八页，2022年，8月28日 第一步：获取目的基因方