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第五部分目录
胚胎实验室手册
胚胎实验室工作规程 1
无菌技术 2
设备校准和维护 3
实验室质控 5
实验室工作流程 6
培养液的配置 7
取精和精液分析 8
精子处理 9
精子冷冻和解冻 10
取卵和卵子处理 10
IVF的授精 11
单精子卵胞浆内注射(ICSI) 13
胚胎的培养和观察 13
囊胚培养 14
胚胎移植 15
胚胎冷冻和解冻 17
辅助孵化 19
胚胎着床前诊断(PGD)操作 19
实验室人员的职业安全 20
病人身份和标本标识 21
实验室记录及保密 21
冻存标本 22
卵子的捐赠 22
事故和问题 22
耗材和管理 23
设备清单 23
消耗品清单 24
试剂清单 25
手术、实验室温度、湿度、通风 25
胚胎实验室工作制度
实验室人员职责 27
实验室人员工作制度 27
实验室物品管理制度 28
实验室仪器维护制度 28
实验室消毒隔离制度 28
实验室工作程序 29
第一部分 实验室质控
实验室质控是辅助生殖技术成功的关键。水、培养液、一次性用品、PVP、试剂、矿物油、混合气体的质量和实验室环境的改变可导致配子和胚胎的发育能力降低。
质控应能在问题出现之前检测出潜在的问题,当检测到问题时应立即采取措施进行纠正。程序和消耗品在没有评估和权威认可时不能随意更改。
一、无菌技术
无菌环境对任何细胞培养的成功都是至关重要的。通常采用的方式是使用垂直层流的超净工作台。工作原理:无菌气流的方向为由上而下的。位于无菌气流中的无菌物品可保持无菌,其上方无其他物体的遮盖。
操作要点:
确定无菌和非无菌物,分开放置,不将非无菌物放在无菌物上方
无菌物应暴露在无菌空气中
所有无菌操作必须在无菌环境中完成
移液时不要过早打开盖子,将盖子放在工作台的后方,内面朝上,并避免在其上方操作
所有移液管、移液头的前端均不可置于操净台外,应朝向内放置
每天工作结束后用消毒蒸馏水擦拭超净台
二、设备校准和维护
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