抗克伦特罗单链抗体在毕赤酵母中的表达研究的中期报告.docxVIP

抗克伦特罗单链抗体在毕赤酵母中的表达研究的中期报告 抗克伦特罗单链抗体（anti-Kluyveromyces lactis lactate dehydrogenase single-chain antibody，aKL sdAb）是一种可用于检测和治疗乳酸菌发酵过程中的污染物的单链抗体。为了提高其表达效率，本实验测试了不同条件下在毕赤酵母中表达aKL sdAb的效果。 首先构建了pPICZαA/aKL sdAb的克隆质粒，并将其转化到毕赤酵母中。通过Western blot验证表达的aKL sdAb的大小和纯度，并测试其与目标抗原的特异结合能力。结果显示，在25°C下培养72小时后，aKL sdAb的表达量最高，且能与Kluyveromyces lactis lactate dehydrogenase结合。同时，将培养基中的甘油浓度调整为0.5%可以促进aKL sdAb的表达。最后，发现将coding sequence optimized的KL-lactate dehydrogenase信号肽序列插入aKL sdAb的N端，可以提高其表达水平和稳定性。 综上，将甘油浓度调整为0.5%，在25°C下培养72小时的条件下表达coding sequence optimized的KL-lactate dehydrogenase信号肽序列插入aKL sdAb的N端的克隆可以得到高效、稳定和纯的aKL sdAb。进一步的研究将着重于优化表达条件和进一步评价aKL sdAb的污染检测和治疗效果。