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- 2023-09-13 发布于上海
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SA-Hifn-α工作2a双功能融合蛋白的原核表达、纯化及体外活性检测的中期报告
该项目的主要目标是在原核表达系统中制备出SA-Hifn-α工作2a双功能融合蛋白,并对其进行纯化和体外活性检测。在过去的几个月中,我们已经完成了以下步骤:
1. 克隆SA-Hifn-α工作2a融合基因。我们使用标准的克隆技术将SA-Hifn-α工作2a融合基因插入了适当的表达载体,以便在大肠杆菌中表达。
2. 原核表达(SOP)。我们基于先前已经发表的方法产生了一个适当的 SOP,以使蛋白质得到高效表达并被正确折叠。
3. 诱导表达并纯化。我们使用在SOP中确定的最佳条件对细胞进行了诱导,并使用几次操作纯化先前的蛋白。在这个阶段,我们正在寻找一种纯化策略,使我们能够获得纯度高的蛋白,并在后续的实验中验证其功能。
未来,我们计划进行以下工作:
1. 优化表达和纯化条件,以获得高质量的蛋白。
2. 继续进行体外活性测试,以验证蛋白是否具有双重功能。
3. 使用其他技术,如质谱分析,对纯化的蛋白进行表征,以确保其为目标蛋白。
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