辛基-琼脂糖凝胶H.P.使用方法.docx

中文名称：辛基-琼脂糖凝胶H.P. 英文名称：Octyl-Sepharose 4FF 凝胶类型：疏水层析填料 结构成分：6%交联琼脂糖 粒径：24-44靘 工作PH值：3-13 操作温度：4-40℃ 性状：白色微球,凝胶状，保存在20%酒精溶液中 用途：生化研究，疏水层析介质，高分辨率，适合生物大分子和疫苗的分离纯化等。 保存条件：RT 操作温度：室温 储存条件：4～28℃ 使用方法： 1．装柱 ① 将所有的试剂和填料达到室温.配制初始缓冲液(平衡液)和缓冲液。 ② 根据柱子大小取所需凝胶的量，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始缓冲液（按凝胶:缓冲液=3:1比例）配成匀浆。 ③ 将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液体（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。 ④ 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意不要使用气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。 ⑤ 打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过，使柱床稳定。用2-3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。 2．平衡 让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。平衡缓冲液一般是高盐浓度的缓冲液，如：0.02～0.05mol/L的PBS加1～2.5mol/L(NH4)2SO4等。 3．上样 ① 样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心、过滤后上柱； ② 一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡洗液